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Développement de sondes β-lactamase spécifiques et universelles par la réaction en chaîne de la polymérase
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La diversité des β-lactamases plasmidiques capables d'hydrolyser les pénicillines et céphalosporines est remarquable chez les bactéries gram-négatives. Par clonage moléculaire, nous avons isolé 30 gènes bla et développé des sondes oligonucleotides couvrant des fragments d'ADN. Chaque fragment contenant bla a été cloné, fragmenté par sous-clonage et séquencé par la méthode didéoxy. L'analyse par ordinateur de ces séquences nous a permis de déterminer des régions hautement conservées. À partir de ces données, nous avons produit des oligonucleotides comme sondes et démontré leur spécificité par hybridation. La technologie du PCR a confirmé la spécificité de ces sondes bla tandis que des combinaisons …

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