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Colloque
Contrairement à l'utilisation des pesticides chimiques, où la mortalité du ravageur cible est le facteur déterminant l'efficacité de traitement, l'utilisation d'agents de lutte biologique demande une connaissance approfondie d'interactions complexes telles les interactions entre l'agent de lutte et le ravageur, ou encore les interactions tri-trophiques « plante hôte–ravageur–agent de lutte ». Les observations macroscopiques sur le ravageur (mortalité, succès reproductif) sont certes essentielles, mais nous laissent avec des ensembles de données empiriques avec lesquelles il est difficile de cerner les éléments-clés de la réponse du ravageur à l'agent de lutte. L'identification de ces éléments-clés, au niveau génétique, nous donnera une …
Communication
La toxicité des protéines insecticides du bacille de Thuringe (Bacillus thuringiensis) est due à leur capacité à former des pores dans la membrane luminale de l'intestin moyen des insectes sensibles. Les hélices alpha du domaine I de ces toxines sont probablement responsables de l'insertion de la toxine dans la membrane et de la formation des pores. Dans le but de préciser le rôle respectif de ces hélices, chacun des résidus chargés des hélices 3 et 4 de la toxine Cry1Aa, à l'exception de ceux qui participent à des ponts salins intramoléculaires, a été remplacé, par mutagénèse dirigée, par un acide …
Communication
Les toxines Cry de Bacillus thuringiensis sont composées de trois domaines structuraux. Le domaine I, formé par un groupe d'hélices alpha, est probablement responsable de l'insertion de la toxine dans la membrane luminale de l'intestin moyen des larves des insectes sensibles et de la formation d'un pore. Les domaines II et III, composés de feuillets bêta, interagissent avec des récepteurs spécifiques situés à la surface de cette membrane et sont donc responsables de la spécificité de la toxine. Les domaines I et II de Cry1Aa sont reliés par quatre ponts salins : D222-R281, R233-E288, R234-E274 et D242-R265. L'élimination de ces …
Colloque
Les protéines entomopathogènes du bacille de Thuringe possèdent deux domaines fonctionnels. La moitié N-terminal est responsable de l'activité canal; la moitié C-terminale est impliquée dans la reconnaissance de récepteurs spécifiques à certaines familles d'insectes. Certaines mutations effectuées dans ces régions très conservées de la protéine diminuent sa toxicité in vivo. Nous avons étudié par la technique des bicouches lipidiques planes les mutants P52R (mutation dans le domaine canal) et R526G (mutation dans le domaine récepteur de CryIA(c)), une toxine de lépidoptère. La toxine naturelle et ces deux mutants forment des canaux cationiques. Les conductances des mutants sont supérieures à celle …
Colloque
Pour développer une sonde d'ADN spécifique pour le P. aeruginosa, on a construit une librairie génomique de la souche PAO1 dans E.coli. Le criblage des clones a été fait par immunoréaction avec des sérum de patients atteints de fibrose kystique, montrant un titre élevé d'anticorps contre les protéines de la membrane externe de P. aeruginosa. Les clones immunoréactifs possédaient un fragment de 23 kb et exprimaient une protéine de poids moléculaire comparable à celui de la lipoprotéine I (10kDa). Cette protéine exprimée s'est avérée sensible aux protéases, associée aux membranes et est particulièrement antigénique. Un fragment IS1 de 2.3 kb …
