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Colloque
Jusqu'à tout récemment, il était impossible de déterminer le spectre complet des changements induits au locus hprt chez des lymphocytes mutants humains HPRT- parce que : 1) la méthode de Southern ne permettait pas de mettre en évidence les délétions de taille inférieure à 6 kb; 2) les mutants ne pouvaient être perdus car leur culture ne permettait pas d'obtenir les 10 millions de cellules nécessaires pour l'extraction de l'ADN et 3) l'amplification sélective (PCR) de l'ADN complémentaire à l'ARNc du gène hprt à partir de lysat cellulaire n'était pas possible à cause de ces problèmes. De plus, Yang et …
Colloque
L'étude des altérations moléculaires induites par des agents de l'environnement est essentielle afin d'établir leur spécificité d'action sur le matériel génétique. L'ozone est un puissant oxydant très répandu dans notre environnement, auquel les humains sont couramment exposés. Nous avons déterminé les altérations moléculaires induites in vitro par l'ozone au locus hprt dans une lignée lymphoblastoïde humaine (TK6). Dans un premier temps, l'ADN de divers mutants a été digéré par l'énonculease de restriction PstI et analysé selon la technique de Southern. Puis, des délétions moléculaires ont été observées consistant en des délétions variant de 6 à 41 Kpb. Ces dommages se …
Colloque
L'étude des altérations moléculaires induites par des agents de l'environnement est essentielle afin d'établir leur spécificité d'action sur le matériel génétique. L'ozone est un puissant oxydant très répandu dans notre environnement, auquel les humains sont couramment exposés. Nous avons déterminé les altérations moléculaires induites in vitro par l'ozone au locus hprt dans une lignée lymphoblastoïde humaine (TK6). Dans un premier temps, l'ADN de divers mutants a été digéré par l'énonculease de restriction PstI et analysé selon la technique de Southern. Puis, des délétions moléculaires ont été observées consistant en des délétions variant de 6 à 41 Kpb. Ces dommages se …
Colloque
Notre environnement renferme des milliers d'agents mutagènes. Étant donné que les mutations sont à l'origine de cancers, il importe de développer des méthodes de détection précoce d'activité génotoxique chez les humains exposés. Cette détection pourrait exploiter le fait que les agents mutagènes induisent souvent des altérations spécifiques dans l'ADN. Nous avons déterminé les altérations moléculaires induites in vitro au locus hprt dans une lignée cellulaire humaine par différents agents chimiques et physiques reconnus pour leur capacité d'induire une variété de changements (substitutions de base, délétions,...). L'ADN des divers mutants a été digéré par l'endonucléase de restriction Pst1 et analysé selon …
