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Colloque
Les D-hydantoinases microbiennes ont un haut potentiel dans la production industrielle des acides aminés par biocatalyse. Dans ce contexte, la recherche et l'isolement de nouveaux microorganismes producteurs de l'enzyme D-hydantoinase est nécessaire. Afin de détecter rapidement de tels organismes, une sonde moléculaire non radioactive a été construite et utilisée de façon à identifier des organismes possédant des gènes codant pour la D-hydantoinase. Un fragment d'ADN issu de Pseudomonas putida DSM 84 contenant le gène codant pour la D-hydantoinase a été cloné puis réduit davantage par des sous-clonages jusqu'à l'isolement d'un fragment de 1.5 kb. Celui-ci a été marqué et utilisé …
Colloque
Les hydantoinases connues sont essentiellement produites par des bactéries aérobies et sont utilisées pour la production de précurseurs d'acides aminés. Une des objections à l'utilisation des hydantoinases de bactéries anaérobies pourrait être l'instabilité de l'enzyme due à la difficulté d'élaborer des systèmes d'anabolisme anaérobie. Pourtant, avec un système de culture tamponnées pré-réduites simples, nous arrivons à améliorer la stabilité et l'activité enzymatique des hydantoinases d'acides aminés tout en stabilisant bien l'enzyme sur des cycles de lyases s'élevant à 30 jours. Cette observation permet d'augmenter la production et la concentration d'acides aminés. Nous comparons la stabilité et l'activité enzymatique des hydantoinases …
Colloque
La production d'acides aminés via des étapes enzymatiques à partir de précurseurs dihydropyrimidines telles les hydantoïnes 5-monosubstituées constitue une alternative intéressante aux procédés classiques (fermentation). Les enzymes de type dihydropyrimidinase (I.B.C. 3.5.2.2) catalysent l'hydrolyse stéréospécifique de dérivés dihydropyrimidique pour donner le N-carbamyl aminoacide chiral correspondant; lequel peut être chimiquement ou enzymatiquement converti en acide aminé. Ces enzymes peuvent avoir une activité analogue sur les hydantoïnes. Au niveau microbien, elles sont surtout détectées chez les bactéries aérobies (Pseudomonas, Arthrobacter). Pour la première fois, une caractérisation partielle i.e. activité et stabilité aux températures et pHs, cinétique enzymatique et courbe de production de …
