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Colloque
Les répétitions inverses sont des traits caractéristiques des origines de réplication chez les prokaryotes et eukaryotes. L'extrusion de ces répétitions inverses en cruciformes transitoires a été démontré in vivo. Les cruciformes ont été impliqués dans la régulation de la transcription, la recombinaison et la réplication de l'ADN in vivo. Il a été postulé qu'une protéine se liant spécifiquement aux cruciformes soit impliquée dans la régulation de ces événements. Une protéine (CBP) de poids moléculaire apparent de 66 kDa, capable de se lier spécifiquement aux cruciformes à la jonction croisée de façon indépendante de la séquence a été isolée des extraits …
Colloque
Un chromosome artificiel chez les mammifères a besoin de trois éléments génétiques qui agissent en cis: une origine de réplication de l'ADN, un centromère et des télomères. Le plasmide pYACneo de 15.8 kb contient les éléments de levure ARS, CEN et TEL, ainsi que les marqueurs de résistance d'ampicilline et de néomycine. À partir de ce plasmide, trois origines mammifères de réplication de l'ADN ont été clonées séparément dans le site EcoRI: 343, une origine du chromosome 6q; X24, un élément génétique qui inclus la zone d'initiation de réplication de DHFR chez les hamsters; et S3, une séquence qui peut …
Colloque
Ors12, une origine de réplication de l'ADN précédemment isolée de l'ADN naissant de cellules de singe CV-1, peut se répliquer de façon autonome après transfection dans des cellules HeLa et dans un système in vitro utilisant des extraits de ces mêmes cellules. Elle contient une région a-satellite (~168 nt) ainsi qu'une région non répétitive qui est présente à moins de neuf copies par génome. Ors12 s'associe également à la matrice nucléaire en relation avec le cycle cellulaire. Afin de démontrer que l'initiation de la réplication de l'ADN se situe sur ou près du locus chromosomique de ors12, nous avons généré …
