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Colloque
Notre équipe a récemment cloné deux DNA complémentaires codant pour les protéines mPCI et mPC2. Ces deux protéines ont récemment été rapportées comme étant des enzymes capables de couper les prohormones polypeptidiques au pairs d'acides aminés basiques produisant ainsi des hormones biologiquement actives. Afin de caractériser davantage ces deux protéines, nous avons cloné les DNA dans le vecteur pJVN de L.I.'isolement des recombinants de baculovirus devrait alors nous permettre de produire une grande quantité de protéines pouvant atteindre des ng/l de milieu de culture. Nous avons pu purifier ces protéines par affinité à l'aide d'anticorps développés contre la forme recombinante …
Colloque
La Plasma Kallikréine (PK) a été proposée, dans notre laboratoire, comme enzyme de maturation potentielle de pro-hormones. Quoique les structures des ADNc du Facteur XI humain et de la PK de rat présentent une homologie de 58%, la PK possède des activités très différentes. Comme la seule séquence génomique connue est celle du Facteur XI humain (Azakari et al), il est important d'établir une étude comparative des gènes de ces deux séries d'enzymes. Par les techniques de biologie moléculaire incluant le PCR la séquence de clones génomiques de la PK de rat, nous avons pu définir la présence de 15 …
Colloque
Le PSP94 fut d'abord isolé du plasma séminal humain. Son expression est localisée au niveau des cellules épithéliales de la prostate. L'isolation de l'ADN complémentaire (ADNc) humain nous a fourni une sonde pour déterminer si le PSP94 était exprimé chez d'autres espèces. Parmi les différentes espèces étudiées (rat, mouton, bouc, singe), seul le singe était positif. Nous avons donc entrepris d'isoler son ADN afin de comparer la structure des PSP94 simien et humain. Une librairie d'ADNc de prostate de singe a été construite et criblée avec la sonde humaine. Plusieurs clones furent isolés et séquencés. Malgré une homologie de 90% …
Colloque
La chromogranine B (70 kDa) et le 7B2 (21 kDa) sont deux protéines acidiques que l'on retrouve dans les granules de sécrétion d'une grande variété de cellules produisant des hormones peptidiques et/ou neuropeptides. Nous avons dérivé la séquence complète du 7B2 des souris par clonage et séquençage de son ADNc. Un clone partiel d'ADNc de chromogranine B a été aussi obtenu. Ces ADNc ont été utilisés comme sonde pour examiner la distribution des ARNm dans différents tissus et différentes régions du cerveau des souris par buvardage poncé (dot blot) ou par Northern (Northern blot). Les résultats démontrent une superposition extensive …
Colloque
Du liquide séminal humain a été isolé et purifié une protéine de 94 acides aminés capable d'inhiber la sécrétion de la lutropine (LH) et de la follitropine (FSH) par des cellules cultivées d'hypophyse de rat. Cette activité est du type "inhibine" puisqu'elle affecte la FSH plus que la LH. La séquence complète de la protéine a été déterminée. Cette protéine est localisée surtout dans les cellules épithéliales de la prostate. A partir d'ARN polydénylé isolé de cet organe, une librairie d'ADN complémentaire a été construite. Elle a été criblée avec des sondes oligonucléotidiques synthétiques basées sur la séquence peptidique. Plusieurs …
