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Structure de l'ADN complémentaire d'une protéine sécrétoire prostatique simienne de 94 acides aminés (PSP94)
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Le PSP94 fut d'abord isolé du plasma séminal humain. Son expression est localisée au niveau des cellules épithéliales de la prostate. L'isolation de l'ADN complémentaire (ADNc) humain nous a fourni une sonde pour déterminer si le PSP94 était exprimé chez d'autres espèces. Parmi les différentes espèces étudiées (rat, mouton, bouc, singe), seul le singe était positif. Nous avons donc entrepris d'isoler son ADN afin de comparer la structure des PSP94 simien et humain. Une librairie d'ADNc de prostate de singe a été construite et criblée avec la sonde humaine. Plusieurs clones furent isolés et séquencés. Malgré une homologie de 90% …

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Structure de l'ADN complémentaire d'une protéine sécrétoire prostatique simienne de 94 acides aminés (PSP94)
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Le PSP94 fut d'abord isolé du plasma séminal humain. Son expression est localisée au niveau des cellules épithéliales de la prostate. L'isolation de l'ADN complémentaire (ADNc) humain nous a fourni une sonde pour déterminer si le PSP94 était exprimé chez d'autres espèces. Parmi les différentes espèces étudiées (rat, mouton, bouc, singe), seul le singe était positif. Nous avons donc entrepris d'isoler son ADN afin de comparer la structure des PSP94 simien et humain. Une librairie d'ADNc de prostate de singe a été construite et criblée avec la sonde humaine. Plusieurs clones furent isolés et séquencés. Malgré une homologie de 90% …

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Le PSP94 fut d'abord isolé du plasma séminal humain. Son expression est localisée au niveau des cellules épithéliales de la prostate. L'isolation de l'ADN complémentaire (ADNc) humain nous a fourni une sonde pour déterminer si le PSP94 était exprimé chez d'autres espèces. Parmi les différentes espèces étudiées (rat, mouton, bouc, singe), seul le singe était positif. Nous avons donc entrepris d'isoler son ADN afin de comparer la structure des PSP94 simien et humain. Une librairie d'ADNc de prostate de singe a été construite et criblée avec la sonde humaine. Plusieurs clones furent isolés et séquencés. Malgré une homologie de 90% …

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Une méthode manuelle de dégradation d'Edman à haute sensibilité pour la détermination de la séquence des peptides
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Une méthode manuelle de dégradation d'Edman combinée à la chromatographie liquide à haute performance (HPLC) est proposée. La réaction de couplage entre le phenylisothiocyanate (PITC) et le résidu en N-terminal du peptide a lieu dans un tampon de diméthylallylamine (pH 9,5) à 56°C pendant 30 min. On élimine les excès de réactif et les produits secondaires avec le 1-cl-butane, ceci en maintenant les pertes de peptide à cette étape. L'utilisation de HCl 12 N pour cliver l'acide aminé en N-terminal réduit l'accumulation de sels observée avec l'acide trifluoroacétique. Ceci nous permet de séquencer un plus grand nombre de résidus dans …

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