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Colloque
Le cerveau est une structure extrêmement complexe; seulement un terme de types cellulaires, il y règne une diversité remarquable. Or ce qui fait la spécificité d'une cellule, c'est l'ensemble des gènes qui y sont exprimés. Parmi les 30,000 mRNAs produits au cerveau très peu sont abondamment caractérisés. Nous avons isolé par hybridation soustractive à partir d'une banque d'ADNc de singe, 8 clones exprimés spécifiquement au niveau du cortex cérébral par analyse différentielle. L'analyse de la séquence protéique (GENBANK et SWISS-PROT) a montré que cette dernière présente des domaines catalytiques similaires aux ser/thr Kinases modulées par le calcium. Basés sur des …
Colloque
L'effet de la dexaméthasone (DEX), sur la stéroïdogenèse des cellules fasciculées de cobaye en culture primaire, a été étudiée. Les cellules fasciculées sont été préincubées pendant 48 heures en présence de DEX (10 μM). Les cellules sont ensuite été incubées pendant 24 heures en présence de DEX (10 μM) avec ou sans ACTH (100 nM). Le milieu a ensuite été recueilli, les stéroïdes extraits à l'éther-acétone et dosés par RIA après séparation par chromatographie sur Sephadex LH 20. L'incubation des cellules fasciculées avec de la DEX augmente significativement la sécrétion d'androstènedione (de 1,54±0,12 et 50,57 ± 7,16nmol/1 à 2,18±0,25 et …
Colloque
Nous avons récemment démontré l'acylation extensive de la prégnénolone (P) dans le sérum et, par la suite, une accumulation de prégnénolone lipoïde (PL) dans les lipoprotéines de faible densité (LDL). Afin d'étudier le métabolisme de ces stéroïdes, nous avons marqué les LDL avec la P tritiée et la H3PL incorporées dans les LDL. Ce complexe (3HPL/LDL) a d'abord été incubé avec les cellules granulosas du porc en absence ou en présence de FSH ovine ou hCG pour 48h. Les milieux d'incubation ont été extraits et chromatographiés sur C-18. Dans les incubations effectuées avec 3HPL/LDL, nous avons observé 3.3 fois (P<0.01) …
Colloque
Les cellules fasciculées de cobaye en culture primaire sécrètent des C21 stéroïdes (androstènedione(A), et 11β-OH-A) aussi bien que des glucocorticoïdes (cortisol et 11-désoxycortisol). Dans la présente étude, nous avons examiné l'effet des androgènes sur la sécrétion des glucocorticoïdes. Les cellules fasciculées ont été incubées avec ou DHEA (1 μM) en présence ou non d'ACTH (10 nM). La sécrétion des stéroïdes a été mesurée après 3, 12 et 24 heures d'incubation. Le DHEA fait significativement baisser le 11β-OH-A (930 ± 450.6 ± 27.1 ng/50,000 cellules/24 heures). La sécrétion de cortisol, en présence ou non de 10 nM d'ACTH, est significativement diminuée …
Colloque
Les cellules fasciculées de la surrénale de cobaye sécrètent une quantité importante de glucocorticoïdes et C19 stéroïdes en réponse à l'ACTH. Nous nous sommes intéressés à l'influence des stéroïdes estrogènes et androgènes sur la stéroïdogenèse surrénalienne par l'ACTH. Les cellules fasciculées de 5 lobes ont été mises en culture primaire pendant 48 heures en présence ou non d'estradiol (E2) ou de dihydrotestostérone (DHT) (10^-8M). Par la suite, les cellules ont été lavées et incubées avec des concentrations croissantes d'ACTH en présence de l'hormone. L'addition d'E2 ou DHT ne modifie pas le niveau de base ni le Km de stimulation par …
Colloque
Dans le but de développer un radioimmunofalanage sensible et spécifique de la progestérone, nous avons mis au point la technique de production d'anticorps monoclonaux. Une lignée cellulaire de myélome (NSO/1) a été fusionnée à des lymphocytes de rates provenant d'un animal immunisé (souris BALB/c). Les souris ont été injectées à intervalles de trois semaines pendant 4 mois avec 40 μg de progestérone-11-hémisuccinate-BSA. Trois jours avant la fusion, les souris ont reçu un dernier rappel intra-veineux avec 80 μg de l'antigène. Nous avons obtenu 7 colonies positives sécrétant de l'anticorps anti-progestérone. Par la suite, le clonage des cellules a été effectué …
