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Les protéines de la membrane externe de Legionella pneumophila sérogroupes 1 à 8 ont été préparées, à partir d'un lysat bactérien, par solubilisation sélective avec du lauryl sarcosinate de sodium. Les protéines ainsi obtenues ont été séparées par électrophorèse sur gel de polyacrylamide en présence de dodécyl sulfate de sodium (SDS-PAGE) et transférées sur des feuilles de nitrocellulose. Des antisérums de lapin dirigés contre chacun des 8 sérogroupes de L. pneumophila ont été obtenus en immunisant chaque animal avec des bactéries vivantes. Les protéines transférées ont été révélées avec ces antisérums et des immunoglobulines de cochon anti-immunoglobulines de lapin marquées …
Les lignées myélomateuses disponibles pour la production d'anticorps monoclonaux humains sont de pauvres partenaires de fusion. Le nombre d'hybrômes obtenus est faible et peu d'entre eux sécrètent des immunoglobulines. Pour tenter de solutionner ce problème, nous avons produit des hétéromyélomes en vue de les utiliser comme partenaire de fusion. Ceux-ci ont été obtenus suite à la fusion de splénocytes humains et d'une lignée myélomateuse animale (Sp2/0-Ag 14). Huit hétéromyélomes ont été choisis sur la base de leurs caractéristiques de croissance et ont été rendus résistants à la 8-azaguanine. Quatre de ces mutants ont été choisis selon les mêmes critères et …