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Opsonisation et phagocytose : mise en évidence en double fluorescence
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Nous avons mis au point un test en double fluorescence permettant de visualiser en séquence l'adhérence puis l'ingestion de particules opsonisées. Des billes fluorescentes activées de 1 um de diamètre (Covaspheres®), portant préalablement enrobées d'Ig de souris, puis incubées avec des macrophages murins (lignée P388D) cultivés sur des lamelles de verre. Les macrophages sont ensuite colorés au bleu d'Evans fournissant ainsi une contrecoloration rouge des cellules à 495 nM. On a pu ainsi mettre en évidence que (1) l'adhérence des particules aux macrophages a lieu en 10-20 minutes, celles-ci étant ingérées en 40-60 minutes; (2) que le phénomène n'a lieu …

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