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Colloque
Les cellules épithéliales non-ciliées des bronches (Clara) ont des caractéristiques morphologiques et cytochimiques suggérant des fonctions sécrétoires et oxydatives. Le but de ce travail était d'étudier le métabolisme de l'acide arachidonique (AA) par des cellules purifiées de poumon de cobaye et mises en culture. Le tissu pulmonaire a été dissocié par digestion enzymatique. Les cellules de Clara ont été isolées par plusieurs étapes de purification (élutriation, gradient de Percoll, adhésion différentielle). Les cellules de Clara purifiées (pureté de 85%) ont été cultivées dans le milieu DMEM/F-12 pendant 5 jours. Les stimulations des cellules de Clara en culture ont entraîné une …
Colloque
L’asthme est essentiellement caractérisé par une bronchoconstriction, une inflammation des voies aériennes et une hyperréactivité bronchique (HRB). Nous avons récemment développé chez le cobaye un modèle d’HRB associé à une hyperéosinophilie pulmonaire (HP), par l’injection de billes de Sephadex. Dans le but de mieux comprendre les mécanismes régulant l’HRB, nous avons testé l’effet de différentes substances pharmacologiques sur l’HRB à l’acétylcholine (ACh) et à l’histamine (His). L’HRB a été mesurée pour ces bases biologiques in vitro, un jour après l’injection des billes. Le tableau suivant indique le pourcentage d’inhibition (−) ou d’augmentation (+) de la réponse après traitement avec l’aspirine …
Colloque
Le thromboxane A2 (TxA2) est un métabolite de l'acide arachidonique possédant des propriétés pro-agrégante et bronchoconstrictrice. Afin de déterminer les mécanismes d'amplification de ces phénomènes, nous avons étudié l'existence de coopérations cellulaires dans la synthèse du TxA2, entre les plaquettes (P) et les macrophages (M) ou les éosinophiles (E) ou les cellules de Foà-Kurloff (FK) de cobaye. La co-stimulation des P (1 x 10^9 P/ml) avec 1,2 et 6 x 10^6 M/ml par l'ionophore A23187 (5µM) a induit une augmentation de la synthèse de TxA2 (comparée à la somme des synthèses individuelles de cellules stimulées), de 58, 35 et 55%, …
Colloque
Les mécanismes de l'hyperréactivité bronchique (HRB) sont définis. Afin de comprendre le rôle joué par les éosinophiles dans l'HRB, nous avons créé un modèle in vivo d'HRB chez le cobaye associé à une hyper-éosinophilie, par injection intraveineuse de billes de Séphadex. L'HRB a été mesurée in vitro sur le parenchyme pulmonaire (PP), la bronche principale (BP) et la bronche interne (BI) d'animaux traités et certains en réponse à différentes concentrations d'histamine (H) et d'acétylcholine (A). L'HRB a été évaluée 1, 7 et 14 jours après l'injection, par le pourcentage d'augmentation de la contraction maximale (voir tableau, * p < 0.01).
Colloque
Les cellules de Clara des voies aériennes ont des caractéristiques morphologiques et cytochimiques suggérant des fonctions sécrétrices et oxydatives. Le but de notre travail était d'isoler ces cellules et d'étudier le métabolisme de l'acide arachidonique. Le traitement du poumon de cobaye à la protéase XIV permet la récupération de 66.8 x 10^6 cellules. Ces cellules ont été partiellement purifiées par quatre étapes d'élutriation (39-46% de Clara). L'adhésion sur boîte de Petri permet d'éliminer les macrophages. Un gradient de Percoll discrimine 23 millions de pures cellules de Clara (75-85%). Mises en présence de LTA4, de l'ionophore de Ca A23187 et/ou de …
Colloque
Cette étude vise à identifier les métabolites de l'acide arachidonique (AA) libérés par les pneumocytes de type II (PII) de cobaye. Après digestion enzymatique (713.4 ± 41.3 x 10^6, viabilité 86%), les cellules sont séparées par élutriation et la fraction (3 débit: 15 ml/min) est incubée 20 min à 37°C dans des boîtes de Pétri tapissées d'égine de cobaye. Suite à cette incubation, les PII représentent 90% des cellules demeurées en suspension. La libération basale de TxB2, 6-céto-PGF1α et de PGE2 par 2 x 10^6 cellules PII incubées pour 10 min à 37°C d'environ 105, 110 et 77 pg/ml respectivement. …
Colloque
Les cellules Foa-Kurloff (FK) sont des cellules mononucléaires caractérisées par une inclusion intracytoplasmique (complexe mucoprotéine-mucopolysaccharide). Les cellules FK sont retrouvées exclusivement chez le cobaye mais leur origine cellulaire et leurs fonctions n'ont pas été élucidées. Les cellules FK pulmonaires ont été isolées par digestion enzymatique, (713.4 ± 41.3 x 10^6 cellules, viabilité 86.6 ± 1.6%) puis séparées par élutriation, la fraction R (pom, 30 ml/min) contenant environ 60% de cellules FK. Les cellules FK ont été purifiées, 98% de viabilité sur un gradient de Percoll continu. Le métabolisme de l'acide arachidonique (AA) a été étudié: ces cellules possèdent une grande …
Colloque
Les éicosanoïdes constituent une famille importante de médiateurs lipidiques dérivant de l'oxydation de l'acide arachidonique (AA). Nous avons évalué l'importance de ce métabolisme au niveau de l'épithélium de la trachée de cobaye en mesurant la synthèse de prostaglandine E2 (PGE2), de 6-céto-PGF1α, de thromboxane B2 (TxB2) (EIA) et des leucotriènes (LT) (RP-HPLC) par ces cellules isolées. Les cellules épithéliales ont été dissociées de la lamina propria par une méthode non enzymatique, en utilisant un agent chélateur, l'EDTA. Les principaux types cellulaires identifiés par microscopie électronique sont des cellules ciliées (~40%), à mucus (~25%), Clara (~25%) et indifférenciées (~10%). Les cellules …
