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La famille des microARN (miARN) humains let-7 est composéede treize membres qui jouent des rôles essentiels dans plusieurs processus biologiques, tels que le développement cellulaire et la suppression de tumeurs. L’altération des niveaux de miARN let-7 est associée à plusieurs types de cancers. Dicer est l'endoribonucléase responsable de la conversion du précurseur de miARN (pré-miARN) en miARN mature et joue ainsi un rôle crucial dans le contrôle des niveaux cellulaires des miARN let-7. On suppose que les différentes séquences et caractéristiques structurales des précurseurs de miRNA let-7 pourraient être responsables des activités différentielles de liaison et clivage par Dicer. Notamment, …
Les miARN de la famille let-7 sont des acteurs importants dans la cellule car ils régulent la différenciation cellulaire, le développement neurologique et la suppression tumorale. La famille let-7 suit la voie canonique de biogenèse des miARN, dans laquelle le miRNA mature est produit suite au traitement de formes immatures par les ribonucléases Drosha et Dicer. Fait intéressant, dans certains types de cancer, les formes précurseurs des miARN let-7 sont présentes, tandis que les formes matures sont régulées à la baisse, ce qui suggère une mauvaise régulation de la maturation des ARN précurseurs de let-7 (pré-let-7) à l'étape de clivage …
La plateforme de biologie structurale de l'Université de Montréal offre l’accès à plusieurs instruments scientifiques à la fine pointe de la technologie pour répondre aux questions de biologie structurale de la communauté scientifique.Celle-ci comprend trois spectromètres de résonance magnétique (NMR) à haut champs (500 MHz, 600 MHz avec cryo-sonde et 700 MHz) contrôlés par les récentes consoles NEO de Bruker. Un instrument de BioSAXS (diffusion des rayons X aux petits angles) avec robotique pour le criblage à haut débit est aussi disponible. Cet instrument peut aisément être couplé à un système de chromatographie liquide pour les applications de SEC-SAXS.D’autres instruments …
Les miARN de la famille let-7 sont des acteurs importants dans la cellule car ils régulent la différenciation cellulaire, le développement neurologique et la suppression tumorale. La famille let-7 suit la voie canonique de biogenèse des miARN, dans laquelle le miRNA mature est produit suite au traitement de formes immatures par les ribonucléases Drosha et Dicer. Fait intéressant, dans certains types de cancer, les formes précurseurs des miARN let-7 sont présentes, tandis que les formes matures sont régulées à la baisse, ce qui suggère une mauvaise régulation de la maturation des ARN précurseurs de let-7 (pré-let-7) à l'étape de clivage …
Une stratégie couramment utilisée en sciences afin de résoudre un problème complexe consiste à le décomposer en plusieurs parties plus simples, qui peuvent alors être résolues plus facilement. Bien que les molécules d'ARN soient de nature modulaire, l'application de ce type de stratégies pour la détermination de structures tridimensionnelles d'ARN a été plutôt limitée jusqu’à maintenant. Par conséquent, nous avons développé une nouvelle approche combinatoire, que nous avons appliquée afin de déterminer des ensembles structuraux à haute résolution d’un ribozyme VS de Neurospora. En premier lieu, des études de RMN et de SAXS ont été menées sur plusieurs sous-domaines isolés …
Il y a déjà quelques années, nous avons développé la méthode ARiBo pour la purification par affinité d’ARN produits in vitro et avons démontré que cette nouvelle méthode permet la purification rapide d’ARN sous forme native avec de bons niveaux de rendement et de pureté. Depuis, la méthode ARiBo a été optimisée pour capturer des protéines d’un extrait cellulaire qui lient un ARN cible. Pour ces expériences de pull-down d’ARN, les tige-boucles présentes dans les formes immatures des microARN (miARN) de la famille let-7 (let-7-a-1 et let-7g) ont été utilisées comme ARN cible. La méthode de pull-down ARiBo a été …
Il y a déjà quelques années, nous avons développé la méthode ARiBo pour la purification par affinité d’ARN produits in vitro et avons démontré que cette nouvelle méthode permet la purification rapide d’ARN sous forme native avec de bons niveaux de rendement et de pureté. Depuis, la méthode ARiBo a été optimisée pour capturer des protéines d’un extrait cellulaire qui lient un ARN cible. Pour ces expériences de pull-down d’ARN, les tige-boucles présentes dans les formes immatures des microARN (miARN) de la famille let-7 (let-7-a-1 et let-7g) ont été utilisées comme ARN cible. La méthode de pull-down ARiBo a été …