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Dans la recherche d'une méthode de chromatographie d'affinité destinée aussi bien à étudier certaines propriétés de la myosine qu'à la purifier à partir de tissus non-musculaires, nous avons réussi à immobiliser la F-actine dans des colonnes d'agarose sans modifier chimiquement cette protéine. Les colonnes ainsi obtenues permettent une excellente purification de la myosine et de ses sous-fragments protéolytiques tout en préservant un détail majeur: elles sont peu stables et perdent leur activité et leur actine en 1-2 semaines. L'utilisation du principe actif de l'Amanite phalloïde, la phalloidine, permet une stabilisation spectaculaire des colonnes de F-actine sans changer son affinité envers …
Dans la recherche d'une méthode de chromatographie d'affinité destinée aussi bien à étudier certaines propriétés de la myosine qu'à la purifier à partir de tissus non-musculaires, nous avons réussi à immobiliser la F-actine dans des colonnes d'agarose sans modifier chimiquement cette protéine. Les colonnes ainsi obtenues permettent une excellente purification de la myosine et de ses sous-fragments protéolytiques tout en préservant un détail majeur: elles sont peu stables et perdent leur activité et leur actine en 1-2 semaines. L'utilisation du principe actif de l'Amanite phalloïde, la phalloidine, permet une stabilisation spectaculaire des colonnes de F-actine sans changer son affinité envers …
On découvre des protéines contractiles dans une grande variété de cellules non musculaires. La myosine varie beaucoup d'un organisme à l'autre, ce qui la rend particulièrement intéressante à étudier. Les méthodes traditionnelles de purification de cette protéine sont, pour la plupart, longues et peu efficaces, étant donné sa faible quantité dans les cellules non musculaires. Comme de l'aminoréaction spécifique entre l'actine et la myosine, la chromatographie d'affinité pourrait s'avérer une méthode de premier niveau. On a déjà réussi à fixer chimiquement de l'actine à l'agarose mais cette méthode n'a jamais été utilisée avec la myosine. Nous avons mis au point …
On découvre des protéines contractiles dans une grande variété de cellules non musculaires. La myosine varie beaucoup d'un organisme à l'autre, ce qui la rend particulièrement intéressante à étudier. Les méthodes traditionnelles de purification de cette protéine sont, pour la plupart, longues et peu efficaces, étant donné sa faible quantité dans les cellules non musculaires. Comme de l'aminoréaction spécifique entre l'actine et la myosine, la chromatographie d'affinité pourrait s'avérer une méthode de premier niveau. On a déjà réussi à fixer chimiquement de l'actine à l'agarose mais cette méthode n'a jamais été utilisée avec la myosine. Nous avons mis au point …