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Caractérisation par potentiométrie et RPE de l'antenne chez Rhodospirillum rubrum
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Au moyen de la photosynthèse, l'énergie lumineuse est transformée en énergie de potentiel rédox. Lors de cette transformation, intervient toute une série de processus qui ont lieu dans les membranes photosynthétiques. Dans une première étape, l'énergie lumineuse est absorbée par un complexe de protéine-pigment, l'antenne. L'antenne de Rs. rubrum présente une seule bande d'absorption dans l'infrarouge à 880 nm, mais elle n'est pas homogène. Cependant, une partie de celle-ci subit des changements d'absorption réversibles en résonance de K3Fe(CN)6 avec Em = 755 mV. Parallèlement à ces changements, il apparaît un signal RPE de 3,8 Gauss dû à la Bchl oxyde. …

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Contenu peptidique du complexe de l'antenne chez Rhodospirillum rubrum
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L'antenne de Rs. rubrum est organisée en complexes protéine-pigment, qui avaient été isolés à partir des membranes photosynthétiques (chromatophores). Les complexes purifiés présentent un spectre d'absorption comparable à celui des chromatophores. Cette similitude indique l'absence de dénaturation pendant la purification. L'analyse électrophorétique sur polyacrylamide-SDS, montre la présence de deux polypeptides de masse moléculaire différente, entre 8 et 12 Kdaltons (des théories courantes présentent l'antenne de Rs. rubrum comme étant constituée d'un seul polypeptide). Le réactif de Schiff acide périodique colore fortement la bande de masse moléculaire plus élevée. Cela laisse entrevoir l'existence d'au moins une glycoprotéine dans le complexe. Des …

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L'accepteur primaire d'électrons du centre photochimique de Rhodospirillum rubrum
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La nature de l'accepteur primaire d'électrons du centre photochimique de Rhodospirillum rubrum a fait l'objet de recherches qui ont donné des résultats contradictoires depuis 1972. Nos travaux ont mis en évidence que le photochimique de Rhodospirillum rubrum contient une molécule d'ubiquinone fermement liée à une molécule de fer. L'ubiquinone ne se manifeste pas si le fer est enlevé en enliant les hétéroïdes sur un milieu exempt de fer. L'activité photochimique est restaurée lorsqu'on enlève l'ubiquinone et réintroduit une nouvelle. Nous avons mesuré l'activité photochimique en observant les effets d'une oxydation du complexe [Fe-UQ] et l'accepteur primaire réduit, grâce à la …

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Études du centre photochimique de la souche G-9 de Rhodospirillum rubrum à l'aide d'une sonde fluorescente
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Le marqueur fluorescent ANS (acide 1,8-aminonaphtalènesulfonique) a été utilisé pour étudier des changements de l'environnement moléculaire du donneur primaire d'électron PB70 lors de sa photooxydation. Nous avons observé, lors de cette photooxydation, une diminution de l'intensité de fluorescence du marqueur. Cette diminution est reliée au processus de transfert des charges comme en fait foi l'identité des cinétiques et la relaxation des processus entre 128 et 300 K. Cette diminution est reliée à la résultante d'un effet électrochromique. Nous avons observé que lors de la réduction de l'ANS la diminution de fluorescence vis-à-vis de la température dans le processus de relaxation …

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L'interaction ubiquinone-centre photochimique
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L'accepteur primaire d'électrons du centre photochimique de Rhodospirillum rubrum et de Rhodopseudomonas spheroides est l'ubiquinone. Cette ubiquinone (UQ) est fermement liée au centre photochimique de telle sorte qu'elle ne peut en être détachée que sous l'influence de la phénanthroline et de dérivés. Elle est plus fermement liée au centre photochimique de R. rubrum qu'à celui de R. spheroides et ne peut s'échanger que lentement. Ceci est confirmé par l'étude des expériences de photoréduction et d'oxydation. Cette étude indique un rôle du fer pour la liaison de l'UQ. Nous avons étudié l'échange de l'UQ complexe dans le centre photochimique avec une …

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L'accepteur primaire du centre photochimique: site de la photoproduction des radicaux superoxyde
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Nous avons déjà montré que l'activité du centre photochimique isolé de Rhodospirillum rubrum entraînait la formation de radicaux superoxyde. Dans le but de déterminer la nature de l'intermédiaire responsable de la réduction de l'oxygène moléculaire en superoxyde, nous avons comparé les cinétiques d'apparition du superoxyde avec les cinétiques de réoxydation de l'accepteur primaire. L'analyse de ces mesures dans des préparations avec et sans ubiquinone a révélé que l'oxygène moléculaire est réduit au niveau de A-430, une semi-ubiquinone, agissant comme accepteur primaire, et que le réservoir d'accepteurs secondaires ne participe pas à la formation des radicaux superoxyde.

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Géométrie des molécules de bactériochlorophylle dans le centre photochimique de Rhodospirillum rubrum
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Clarke et al. (Biochem. Biophys. Res. Commun. 71, 671 (1976)) ont récemment proposé un modèle géométrique pour la "paire spéciale" de bactériochlorophylle (Bchl) du centre photochimique bactérien. À partir de ce modèle, nous avons calculé les moments dipolaires relatifs ainsi que les angles de polarisation de ces molécules de Bchl en supposant qu'elles sont couplées par interaction excitonique. La technique de photodissolution à 77°K ne nous a pas permis de repérer les bandes d'absorption prédites par ce calcul. En combinant nos résultats avec ceux de Clarke et al. nous pouvons conclure au sujet de ces deux Bchl que: a) elles …

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Étude de l'interrelation entre les molécules de bactériophéophytine et bactériochlorophylle dans le centre photochimique bactérien
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Le centre photochimique de Rhodospirillum rubrum (souche G-9) porte quatre molécules de bactériochlorophylle (Bchl) et deux molécules de bactériophéophytine (Bphé0). L'étude par photolyse éclair (10^-12 sec) des cinétiques de dépolarisation permet d'attribuer à l'une des molécules de Bphé0 le rôle d'accepteur intermédiaire entre le donneur (P870) et l'accepteur primaire d'électron. C'est justement l'étude des interrelations entre les deux molécules de Bphé0 et les molécules de Bchl qui nous intéresse. Nous avons entrepris l'estimation de l'angle formé entre les transitions Qx des molécules de Bphé0 dans le centre photochimique par photodichroïsme linéaire à 77°K. Nous avons également montré que l'efficacité du …

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Structure et fonction des caroténoïdes du centre photochimique isolé de Rhodospirillum rubrum
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Le centre photochimique isolé de la souche sauvage de R. rubrum contient une molécule de spirilloxanthine par équivalent de donneur primaire d'électrons (P870). Celui qu'on isole de la souche G9 a la même constitution pigmentaire en ce qui a trait à la bactériochlorophylle et à la bactériophéophytine, mais il est dépourvu de caroténoïde. L'utilisation de sondes telles que l'adrénaline et le diphényl-isobenzofuranne a montré que l'oxygène singulet est principalement responsable des dommages photodynamiques importants observés avec le centre photochimique de la souche G9. Cependant, ce dernier peut être protégé à différents degrés contre ces dommages photodynamiques en lui fixant différents …

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Production d'oxygène singulet et rôle des caroténoïdes dans le centre photochimique de Rhodospirillum rubrum
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Le centre photochimique est la protéine porteuse de pigments et d'acceptateurs d'électrons, responsable de la séparation de charges, acte primaire de la photosynthèse. Lorsque cette protéine est soumise à des intensités lumineuses sursaturantes, l'activité photochimique est accompagnée de formation d'oxygène singulet et d'une oxydation irréversible des pigments. L'étude comparative de ce phénomène entre le centre photochimique extrait de la souche sauvage de R. rubrum contenant de la spirilloxanthine, et dans celui extrait de la souche G9 ne contenant aucun caroténoïde, révèle que la spirilloxanthine joue sur notre photochimie de la souche sauvage en empêchant l'oxydation d'oxygène singulet de même que …

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