Veuillez choisir le dossier dans lequel vous souhaitez ajouter ce contenu :
Filtrer les résultats
Colloque
La pyruvate kinase de Vibrio costicola a un poids moléculaire de 270,000 g/mol mesuré par chromatographie d'exclusion dans un milieu contenant 25% de glycerol. En absence de glycerol, l'enzyme a un poids moléculaire moyen inférieur, mesuré par centrifugation à l'équilibre. La dilution de l'enzyme réduit son activité spécifique suivant un équilibre monomère-tétramère. Le substrat phosphoénolpyruvate et l'activateur adénosine monophosphate rétablissent l'activité spécifique maximum. En absence d'activateur l'enzyme dilué présente une cinétique biphasique pour des concentrations croissantes de phosphoénolpyruvate. Ce phénomène est attribué à la polymérisation de l'enzyme en une forme plus active sous l'influence du substrat.
Colloque
Vibrio costicola est une bactérie modérément halophile qui requiert une concentration molaire de sel pour sa croissance. Comme la concentration intracellulaire de sel s'élève à la même valeur, il s'ensuit que les enzymes de Vibrio costicola l'encontre sont dans un environnement capable d'inhiber considérablement les enzymes normaux. Parmi ces enzymes des halophiles, la pyruvate kinase a été étudiée pour investiguer l'effet du sel sur sa cinétique. La pyruvate kinase de Vibrio costicola présente une cinétique remarquable caractérisée par la présence d'un plateau. L'enzyme a été purifiée jusqu'à l'homogénéité et présente la même cinétique à l'état pur que dans un extrait …
Colloque
L'activité de la pyruvate kinase de Vibrio costicola, purifiée par chromatographie sur Sephadex G-75, est mesurée dans des conditions standards: température ambiante, 0.1M KCl et substrats saturants. Lorsque l'enzyme est pré-incubée dans des conditions différentes de température et de concentration en sel, son activité standard est modifiée. Une pré-incubation à 30°C, augmente son activité et la présence d'une haute concentration en sel augmente sa stabilité. L'inactivation observée lors de la pré-incubation à 40°C, est partiellement réversible en ramenant la température à 30°C. Lorsque l'essai enzymatique est conduit à des concentrations variables en phosphoénolpyruvate, la réaction apparait biphasique. Les résultats sont …
Colloque
Vibrio costicola est une bactérie modérément halophile, aérobique stricte, capable de pousser sur un milieu minimum sels-glucose. L'activité de la pyruvate kinase est mesurée dans l'extrait cellulaire grâce à l'essai spectrophotométrique de la réaction couplée avec la lactico-déshydrogénase. Les concentrations en phosphoénolpyruvate, ADP, NADH et lactico-déshydrogénase ont été optimisées pour des concentrations variables en sel (NaCl ou KCl). L'activité pyruvate kinase semble être inhibée par des concentrations de sel comparables aux conditions intracellulaires. Une purification préliminaire de l'extrait cellulaire a été réalisée par élimination des acides nucléiques à la protamine sulfate et chromatographie d'exclusion.
