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Les grains zymogènes du pancréas ont été purifiés par centrifugation différentielle et par équilibre isopycnique dans un gradient de sucrose. Afin de déterminer les conditions optimum de purification, une étude de leur stabilité en fonction de la concentration de sucrose, du pH, de la force ionique et de la température a été effectuée. Les grains sont purifiés à pH 6.0, 0.65M sucrose, 5×10-3M, Morpholine éthane acide sulfonique à 0°. Les grains zymogènes purifiés par centrifugation différentielle ont une bonne apparence morphologique mais sont légèrement contaminés par des mitochondries et des lysosomes. Après purification par équilibre isopycnique, leur morphologie est moins …
Des grains zymogènes purifiés par centrifugation différentielle sont lysés lentement à pH 7.4 dans une solution 1.0M de sucrose. Cette solution est placée dans un tube de centrifuge et recouverte d'une solution 0.3M sucrose. Après une centrifugation de 30 min. à 100,000g les membranes se retrouvent à l'interface entre les deux solutions. Un examen de ces membranes au microscope électronique révèle que la plupart sont sous forme de vésicules apparemment fermées. Elles ont une activité faible et variable de cytochrome C oxydase, de phosphatase acide et de 5'-nucléotidase. Par contre, elles possèdent une activité spécifique ATPasique qui peut aller jusqu'à …
Des grains zymogènes purifiés par centrifugation différentielle sont lysés lentement à pH 7.4 dans une solution 1.0M de sucrose. Cette solution est placée dans un tube de centrifuge et recouverte d'une solution 0.3M sucrose. Après une centrifugation de 30 min. à 100,000g les membranes se retrouvent à l'interface entre les deux solutions. Un examen de ces membranes au microscope électronique révèle que la plupart sont sous forme de vésicules apparemment fermées. Elles ont une activité faible et variable de cytochrome C oxydase, de phosphatase acide et de 5'-nucléotidase. Par contre, elles possèdent une activité spécifique ATPasique qui peut aller jusqu'à …
Des grains zymogènes purifiés par centrifugation différentielle sont lysés lentement à pH 7.4 dans une solution 1.0M de sucrose. Cette solution est placée dans un tube de centrifuge et recouverte d'une solution 0.3M sucrose. Après une centrifugation de 30 min. à 100,000g les membranes se retrouvent à l'interface entre les deux solutions. Un examen de ces membranes au microscope électronique révèle que la plupart sont sous forme de vésicules apparemment fermées. Elles ont une activité faible et variable de cytochrome C oxydase, de phosphatase acide et de 5'-nucléotidase. Par contre, elles possèdent une activité spécifique ATPasique qui peut aller jusqu'à …