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Étude électrophysiologique et ultrastructurale des cellules ventriculaires de rat nouveau-né en culture
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Des amas de cellules ventriculaires de rat nouveau-né de moins de 48 h. et plus après l'implantation des potentiels d'action déterminés uniquement par le courant lent de ces foyers représente un changement des propriétés électrophysiologiques cellulaires après la mise en culture. Le but de cette étude était de savoir si les changements électriques après l'implantation sont accompagnés de variations ultrastructurales. Après avoir mesuré les potentiels d'action par microélectrodes d'un amas de cellules ventriculaires en culture, celui-ci fut fixé au glutaraldéhyde-osmium et inclus en épon. Les coupes ultrafines montraient 1) la présence de myocytes à contenu myofibrillaire normal, de fibroblastes, de …

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Études morphologiques et biochimiques des membranes de grains zymogènes pancréatiques du rat
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Les granules purifiés ont été fixés au glutaraldéhyde et observés au microscope électronique après cryodécapage et gravure. Outre le petit nombre de particules intramembranaires sur les surfaces E et P des membranes, des nodules importants ont été observés sur la surface PS ainsi qu'une réticulation sur la surface ES. Les schémas électrophorétiques des protéines solubilisées à partir de membranes purifiées de granules, avec ou sans lavage à pH 11,5 ont été comparés avec ceux obtenus avec les protéines obtenues à partir de lysat de grains zymogènes de suc pancréatique. Cinq protéines membranaires ont été ainsi identifiées, l'une d'entre elles étant …

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Étude en cryodécapage de la membrane plasmique des cellules épithéliales isolées de la vessie de grenouille
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Les cellules de l'épithélium de la vessie de grenouille ont été isolées et examinées en cryodécapage après deux traitements expérimentaux : séjour à 40°C durant 20 min ou au contact de l'oxytocine. Les cellules sont isolées en milieu sans calcium contenant 5 mM d'EDTA. Elles sont ensuite fixées dans 2% de glutaraldéhyde en tampon cacodylate à pH 7.4, congelées et fracturées dans un appareil Balzer. On observe : 1. Après séjour à 40°C, des images de transition de phase sur la membrane apicale et latérale des cellules épithéliales. Ces images ne sont pas modifiées après un retour des cellules à …

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Stimulation in vitro de la glucose-6-phosphatase (G-6-Pase) intestinale
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Des explants de jéjunum de souris adultes ont été cultivés pendant 24h sur un milieu composé de DMEM (8) NCTC (1) et sérum de veau foetal (1) additionné de 4 mg de fructose par ml de milieu. L'activité de la G-6-Pase, de la maltase, de la sucrase et de la phosphatase alcaline a été déterminée après 6h et 24h de culture. L'activité totale et spécifique de la G-6-Pase double en 6h et triple en 24h. Les autres enzymes restent inchangées par rapport aux contrôles cultivés 24h en absence de fructose. Les protéines acides diminuent de 15% par rapport aux contrôles. …

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Influence de différents milieux sur la culture organotypique de l'intestin de souris adulte
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Des explants d'intestin de souris adulte ont été cultivés 24 h dans des boîtes Falcon. Une étude comparative des milieux suivants a été entreprise: Trowell T-8, CMRL-1066, Sérumless, DMEM, DMEM-Hepes et un mélange DMEM-Hepes-NCTC 135 avec addition de 0, 10 ou 20% de sérum de veau fœtal. Une analyse détaillée de la morphologie mucosale a été faite à 15 h de viabilité mitotique enregistrée. Les meilleurs résultats sont obtenus avec le DMEM-Hepes mélangé à NCTC-DMEM-Hepes où une bonne préservation de la muqueuse est observée mais la hauteur des villosités reste réduite. Au niveau ultrastructural, plusieurs cellules absorbantes contiennent en leur …

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Morphologie ultrastructurale du muscle lisse de la vessie humaine dans quelques cas pathologiques
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L'ultrastructure du muscle lisse de la vessie humaine a été analysée chez des patients présentant soit une incontinence vésicale, une rétention aiguë ou un cancer vésical irradié. Les fragments musculaires ont été prélevés au cours d'intervention chirurgicale et immédiatement fixés en glutaraldéhyde 3% en tampon phosphate pour 2 h, postfixés en OsO4 2%, déshydratés et enrobés en Epon. Les principales observations peuvent se résumer de la façon suivante. Dans un cas de rétention aiguë, on constate une disparition des nexus entre les cellules musculaires lisses et une infiltration massive de glycogène intracellulaire sous forme de particules et β. Dans un …

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Étude en cryodécapage de la membrane des grains de zymogène du pancréas de rat
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Les grains de zymogène du pancréas de rat isolés par la méthode de Lamy et al. ont été examinés en cryodécapage. Le rôle du fixateur et du cryoprotectant a été étudié. La fraction purifiée est fixée en glutaraldéhyde 3% en paraformaldéhyde 1% en tampon MES-sucrose à pH 6.0 pendant 45 min. Après centrifugation à 5,000 rpm pendant 5 min, le culot placé dans une solution de 40% de sucrose pendant 30 min, puis congelé à -150°C au Freon 22 refroidi à l'azote liquide et fracturé sous vide dans l'appareil Balzers. Les répliques obtenues en platine-carbone subissent différentes attaques puis sont …

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Isolement des cellules intestinales de la souris
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La 1ère partie du jéjunum est prélevée sur 3 cm chez des souris adultes mâles de race suisse ICR. Le fragment est éversé sur un tube de polyéthylène. Une solution de NaCl 0.9% est instillée côté séreux. Le boudin ainsi formé est plongé dans une solution tampon, oxygéné, contenant 10 mM EDTA. La préparation est vibrée 1 min. toutes les 5 min. Toutes les 15 min. le contenu de cellules détachées est récupéré par centrifugation à 900 g et lavé 2 fois dans une solution de Hanks glucosée. La viabilité des cellules est estimée par le Trypan Bleu ou la …

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Étude cytochimique et biochimique de l'influence de la fixation par le glutaraldéhyde sur le comportement de la glucose-6-phosphatase hépatique
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Le foie de souris mâles adultes de race ICR a été fixé par perfusion de 1.25% à 5% de glutaraldéhyde distillé en tampon cacodylate pendant 30 sec. à 6 min. L'inhibition enzymatique a été mesurée par dosage biochimique et la localisation ultrastructurale de l'enzyme recherchée après incubation in milieux de Wachstein-Meisel. La meilleure conservation morphologique et enzymatique a été obtenue pour une perfusion de 1.25% de glutaraldéhyde pendant 6 min. suivie d'un lavage en tampon cacodylate sucrosé de 2 hres. Dans ces conditions les Km des enzymes naturelles sont très semblables aux fortes concentrations de substrat. L'inhibition à pH 5 …

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Culture organotypique de duodénum de cobaye et de souris adulte
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L'examen ultrastructural d'explants de duodénum de cobaye adulte maintenue en culture organotypique in vitro, montre que tous les types cellulaires de la villosité et de la crypte sont bien conservés pendant au moins 24 heures. La localisation cytologique en microscopie électronique de la phosphatase alcaline, de la phosphatase acide, de la glucose-6-phosphatase et de l'alanine pyrophosphatase est identique à celle observée chez les témoins. Les dosages biochimiques de la phosphatase alcaline et de la glucose-6-phosphatase montrent un taux normal d'activité par gramme de tissu pendant les 24 premières heures suivi d'une diminution de 30% pour la glucose-6-phosphatase et de 45% …

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