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Colloque
Nous avons montré que l'alkylation du phage T7 par le méthanesulfonate de méthyle empêche le phage d'injecter, dans la bactérie-hôte, la totalité de son DNA. Par des expériences de fréquence génétique, nous avons tenté d'identifier les segments de DNA injectés par le phage alkylé. Ces expériences ont montré que la fréquence de recombinaison de tous les gènes est diminuée par alkylation; en plus, les gènes tardifs sont plus affectés que les gènes précoces. Pour éclaircir ces résultats, nous avons déterminé les génotypes des phages produits dans les expériences de recombinaison. Les tests de complémentation ont démontré la présence du même …
Colloque
Les causes de l'inactivation immédiate des coliphages T7 traités par les agents alkylants monofonctionnels sont encore mal connues. Nous nous sommes demandé si l'alkylation des protéines de l'enveloppe du phage ne pourrait pas être responsable d'une partie de cette inactivation. Dans le but d'étudier ce problème, nous avons examiné les premières étapes de l'infection (échéance) par des phages T7, traités ou non par EMS ou MMS, dont le DNA était marqué au tritium. Après 8 minutes de contact entre phages et bactéries, la suspension est centrifugée à faible vitesse; le pourcentage de radioactivité présent dans le culot bactérien mesure le …
Colloque
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Nous marquons l'ADN de Escherichia coli, dans ses bases, par culture des bactéries en présence de guanine, adénine et cytosine marquées au carbone 14. L'ADN, isolé et purifié, subit un traitement modéré à l'acide nitreux. Après hydrolyse de cet ADN, l'analyse se fait par chromatographie des bases sur colonne échangeuse d'ions et dosage isotopique.
Colloque
La cinétique d'apparition des mutants létaux est tout à fait différente pour l'E.M.S. (méthanesulfonate d'éthyle) et HNO2. Dans le premier cas, il faut plus de 20 alkylations efficaces par noyau, tandis que pour HNO2 il suffit de 1 à 2 désaminations efficaces. On peut supposer que l'alkylation efficace conduit à la rupture d'une chaîne de l'ADN, tandis que la lésion efficace, produite par HNO2, est un pontage intercaténaire.
