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Isolement et caractérisation de la RNA polymérase chloroplastique-DNA dépendante de Chlamydomonas reinhardtii
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L'inhibition de la synthèse in vivo des tRNA chloroplastiques par la rifampicine est un phénomène bien connu chez Chlamydomonas. Nous avons rapporté (F.J.B. (1979) 96, 125-129) que la rifampicine inhibe totalement les synthèses des RNA chloroplastiques chez les mutants résistants à la rifampicine. Nous présentons des résultats qui montrent qu'il est possible d'isoler un extrait soluble qui synthétise in vitro des RNA chloroplastiques sensibles à la rifampicine, son insensibilité à l'α-amanitine, sa spécificité face aux ions métalliques des exigences en cations et en force ionique. Vue l'impossibilité d'isoler des chloroplastes intacts chez Chlamydomonas, la sensibilité à la rifampicine permet de …

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Isolement et caractérisation de la RNA polymérase chloroplastique-DNA dépendante de Chlamydomonas reinhardtii
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L'inhibition de la synthèse in vivo des tRNA chloroplastiques par la rifampicine est un phénomène bien connu chez Chlamydomonas. Nous avons rapporté (F.J.B. (1979) 96, 125-129) que la rifampicine inhibe totalement les synthèses des RNA chloroplastiques chez les mutants résistants à la rifampicine. Nous présentons des résultats qui montrent qu'il est possible d'isoler un extrait soluble qui synthétise in vitro des RNA chloroplastiques sensibles à la rifampicine, son insensibilité à l'α-amanitine, sa spécificité face aux ions métalliques des exigences en cations et en force ionique. Vue l'impossibilité d'isoler des chloroplastes intacts chez Chlamydomonas, la sensibilité à la rifampicine permet de …

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Mesure de l'activité de la RNA polymérase chloroplastique in vivo chez Chlamydomonas reinhardtii
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Des cellules de Chlamydomonas reinhardtii traitées au toluène à 0°C et 25°C incorporent des ribonucléosides triphosphates (NTP) dans leur RNA chloroplastique à 25°C et 35°C in vitro. L'incorporation requiert les quatre NTP, du Mg++, elle est complètement inhibée par la DNase, la RNase, l'AMP et est inhibée de 90% par la rifampicine (350 µg/ml). Cependant l'incorporation est presque complètement insensible à l'amanitine et au chloramphénicol à 200 µg/ml. Ces résultats montrent que celles traitées au toluène synthétisent principalement le RNA chloroplastique. Ce système est exclusif en vitro, car seulement l'analyse de la RNA polymérase chloroplastique in vivo est possible. En …

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Etude, par microscopie électronique, de l'interaction de la RNA polymérase avec le DNA du phage T7 alkylé par les méthanesulfonates de méthyle et d'éthyle
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L'alkylation du DNA du phage T7 diminue son activité matrice pour la transcription in vitro. Afin de mieux comprendre le mécanisme de cette inhibition, nous avons étudié la première étape de la transcription, l'interaction de la RNA polymérase avec le DNA du phage T7 alkylé. Nous avons, par microscopie électronique, pu mettre en évidence cette interaction. L'analyse, par cette méthode, de l'interaction du DNA non alkylé avec la RNA polymérase a donné les résultats suivants: 1. L'alkylation du DNA ne change l'affinité de la RNA polymérase pour les sites promoteurs et localisés à l'extrémité gauche du DNA de T7; 2. …

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Etude, par microscopie électronique, de l'interaction de la RNA polymérase avec le DNA du phage T7 alkylé par les méthanesulfonates de méthyle et d'éthyle
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L'alkylation du DNA du phage T7 diminue son activité matrice pour la transcription in vitro. Afin de mieux comprendre le mécanisme de cette inhibition, nous avons étudié la première étape de la transcription, l'interaction de la RNA polymérase avec le DNA du phage T7 alkylé. Nous avons, par microscopie électronique, pu mettre en évidence cette interaction. L'analyse, par cette méthode, de l'interaction du DNA non alkylé avec la RNA polymérase a donné les résultats suivants: 1. L'alkylation du DNA ne change l'affinité de la RNA polymérase pour les sites promoteurs et localisés à l'extrémité gauche du DNA de T7; 2. …

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L'orientation socialiste dans la philosophie politique de Shelley
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Shelley est surtout connu comme poète-philosophe romantique, mais il s'est aussi intéressé de très près aux conditions sociales et aux luttes anglaises et irlandaises du siècle dernier. Ainsi, dans ses "a notes on revolutionary" qu'il écrivait en Italie, en Espagne et en Grèce. Plusieurs de ses essais philosophiques (en particulier A Philosophical View of Reform) analysent sous divers angles les révolutions politiques et sociales de l'époque. Dans ces essais, Shelley montre que les révolutions politiques et sociales sont inséparables. En outre plusieurs de ses grands poèmes (par exemple The Masque of Anarchy, Hellas, Ode to Liberty) font le tour de …

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Interaction de la RNA polymérase d'Escherichia coli avec le DNA du phage T7 traité par le méthanesulfonate d'éthyle
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Nous avons montré que l'activité matrice du DNA de T7, mesurée par synthèse de RNA in vitro, est diminuée après traitement par le méthanesulfonate d'éthyle (EMS). La quantité de RNA produite est diminuée, mais la longueur des chaînes de RNA ne change pas. Pour mieux comprendre le mécanisme de cette inhibition, nous avons étudié la première étape de la transcription, l'interaction entre la RNA polymérase d'E. coli et le DNA de T7. Nous avons d'abord mesuré l'affinité de l'enzyme pour le DNA étudié par l'épreuve de compétition. Après traitement du DNA par l'EMS, l'affinité diminue de façon significative. Nous avons …

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Interaction de la RNA polymérase d'Escherichia coli avec le DNA du phage T7 traité par le méthanesulfonate d'éthyle
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Nous avons montré que l'activité matrice du DNA de T7, mesurée par synthèse de RNA in vitro, est diminuée après traitement par le méthanesulfonate d'éthyle (EMS). La quantité de RNA produite est diminuée, mais la longueur des chaînes de RNA ne change pas. Pour mieux comprendre le mécanisme de cette inhibition, nous avons étudié la première étape de la transcription, l'interaction entre la RNA polymérase d'E. coli et le DNA de T7. Nous avons d'abord mesuré l'affinité de l'enzyme pour le DNA étudié par l'épreuve de compétition. Après traitement du DNA par l'EMS, l'affinité diminue de façon significative. Nous avons …

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Caractérisation du RNA synthétisé in vitro à partir du DNA alkylé
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L'alkylation du DNA diminue son activité matrice pour la transcription. Pour mieux comprendre le mécanisme de cette diminution, nous avons caractérisé le RNA produit in vitro à partir du DNA alkylé. Le DNA purifié du bactériophage T7 est alkylé par le méthanesulfonate d'éthyle ou le méthanesulfonate de méthyle. Ce DNA est ensuite employé comme matrice pour la synthèse in vitro du RNA. Après extraction, le RNA est analysé par électrophorèse sur gel de polyacrylamide. Bien que la dose d'alkylant nécessaire pour réduire l'activité matrice du DNA soit semblable pour les deux agents alkylants, leurs mécanismes d'action semblent très différents. La …

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