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Colloque
L'alkylation du DNA du phage T7 diminue son activité matrice pour la transcription in vitro. Afin de mieux comprendre le mécanisme de cette inhibition, nous avons étudié la première étape de la transcription, l'interaction de la RNA polymérase avec le DNA du phage T7 alkylé. Nous avons, par microscopie électronique, pu mettre en évidence cette interaction. L'analyse, par cette méthode, de l'interaction du DNA non alkylé avec la RNA polymérase a donné les résultats suivants: 1. L'alkylation du DNA ne change l'affinité de la RNA polymérase pour les sites promoteurs et localisés à l'extrémité gauche du DNA de T7; 2. …
Colloque
Nous avons montré que l'activité matrice du DNA de T7, mesurée par synthèse de RNA in vitro, est diminuée après traitement par le méthanesulfonate d'éthyle (EMS). La quantité de RNA produite est diminuée, mais la longueur des chaînes de RNA ne change pas. Pour mieux comprendre le mécanisme de cette inhibition, nous avons étudié la première étape de la transcription, l'interaction entre la RNA polymérase d'E. coli et le DNA de T7. Nous avons d'abord mesuré l'affinité de l'enzyme pour le DNA étudié par l'épreuve de compétition. Après traitement du DNA par l'EMS, l'affinité diminue de façon significative. Nous avons …
