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Colloque
Chez le réticulocyte de lapin, environ 10% des ribosomes de la cellule sont associés à la membrane plasmique (polysomes membranaires). Le mécanisme par lequel ces ribosomes se lient à la membrane plasmique et le rôle qu'ils y jouent n'ont pu à ce jour être clairement élucidés. En étudiant les RNA messagers des ribosomes membranaires et des polysomes non membranaires nous avons obtenu certaines indications à l'effet que ces molécules seraient synthétisées directement dans le cytosol à la membrane cellulaire. La plupart des RNA messagers eucaryotes renferment à leur extrémité 3' du segment poly A. La présence ou l'absence de ce …
Colloque
Le désoxycholate est souvent utilisé pour détacher les polysomes des membranes. Nous avons rapporté précédemment que les polysomes membranaires préparés par cette méthode retiennent l'activité arginyl-tRNA synthetase (ArgS), comparativement aux polysomes libres (P.L.). Par contre, la fraction membranaire débarrassée des protéines solubles par lavage et de tous ces produits solubles par centrifugation, possède une activité argS (par A260 de l'extrait) supérieure à celle des P.L. L'activité associée à la fraction membranaire est retrouvée dans les P.L. presque toutes les synthetases. Le glycyl résidu possède de l'activité, la leucine, la glycine et la lysine. En présence de 5% de désoxycholate, les …
Colloque
Alors que chez les Procaryotes les aminoacyl-ARNAs synthétases sont des enzymes "solubles" dont les poids moléculaires sont de l'ordre de 50,000 à 300,000 daltons, chez les cellules animales on les retrouve dans des complexes de hauts poids moléculaires (environ 2 x 10^6 daltons); ces complexes sont soit libres, soit associés aux ribosomes. Afin d'étudier le rôle physiologique de ces associations, nous avons comparé les propriétés de l'arginyl-ARNAsynthétase (ArgRS) libre ou associée aux polysomes. L'activité spécifique de l'ArgRS dans les polysomes libres (P.L.) est de 1,05 fois et 2,8 fois plus grande que dans les polysomes liés aux membranes. La stabilité …
Colloque
Les ribosomes membranaires dans les réticulocytes de lapin peuvent être libérés de la membrane plasmique soit par un détergent, le désoxycholate, soit par un antichoc le pyrophosphate. Les ribosomes détachés par ces procédés ne se dissocient pas de la même façon quand ils sont exposés à l'EDTA. Lorsque les protéines ribosomales sont extraites et analysées sur gel de polyacrylamide en 2 dimensions, les ribosomes membranaires sont identiques quel que soit la méthode de libération employée, et différent cependant des ribosomes libres dans la cellule. La possibilité d'avoir plusieurs étapes fonctionnelles des ribosomes membranaires et plusieurs types d'interaction avec la membrane …
Colloque
Les ribosomes de foie de rat sont dissociés au moyen de divers agents tels que l'EDTA, le pyrophosphate de sodium, le chlorure de potassium à concentrations élevées et le chlorure de potassium en présence de puromycine. Les sous-unités obtenues sont analysées par centrifugation sur gradient de saccharose et les protéines extraites des sous-unités sont séparées par électrophorèse sur gel de polyacrylamide. La composition en protéines est comparée à celle des monosomes obtenus par traitement à la puromycine seulement. L'utilisation d'agents de chélation pour la dissociation provoque la perte d'un petit nombre de protéines ribosomales alors que l'utilisation de chlorure de …
Colloque
Étude des protéines par électrophorèse sur gel de polyacrylamide en deux (2) dimensions. Les ribosomes libres et liés sont isolés et purifiés à partir de réticulocytes de lapin en vue d'étudier leur composition en protéines. Le développement des techniques d'électrophorèse sur gel polyacrylamide en 2D a permis une résolution suffisante pour dénombrer environ 90 protéines dans chaque population de ribosomes étudiée. L'iodination des protéines in vitro à l'aide de 125I permet d'une part de localiser par autoradiographie les protéines "accessibles". Ces techniques mettent en évidence au moins 4 différences au niveau de la distribution des protéines entre ribosomes libres et …
Colloque
Nous avons étudié le métabolisme de l'acide L-ascorbique-1-C14 chez le cobaye maintenu à la température de la chambre, chez le cobaye cobaye exposé à un froid aigu (2°C pendant 24 heures) et chez le cobaye acclimaté au froid (2°C pendant 2 mois). Chez le cobaye témoin, 35% de la radioactivité totale injectée sous forme d'acide L-ascorbique-1-C14 est excrété comme C14O2 dans l'air expiré et 13% dans l'urine après 24 heures. Chez les cobayes exposés à un froid aigu il y a une diminution de l'excrétion de la radioactivité dans l'air expiré et dans l'urine ainsi qu'une rétention de la radioactivité …
Colloque
Un mélange de peptides contenant de la lysine provenant d'un hydrolysat partiel de caséine a été injecté à une chèvre en même temps que de la lysine radioactive. Après deux heures, le lait a été recueilli, et la caséine radioactive, isolée. L'activité spécifique de la lysine dans différentes fractions de peptides isolés d'un hydrolysat partiel de caséine radioactive ne permet pas de déceler une dilution de l'incorporation de la lysine radioactive dans la caséine par les peptides. Il semble donc que les peptides n'ont pas été utilisés tels quels pour la synthèse de la caséine.
Colloque
Un mélange de peptides contenant de la lysine provenant d'un hydrolysat partiel de caséine a été injecté à une chèvre en même temps que de la lysine radioactive. Après deux heures, le lait a été recueilli, et la caséine radioactive, isolée. L'activité spécifique de la lysine dans différentes fractions de peptides isolés d'un hydrolysat partiel de caséine radioactive ne permet pas de déceler une dilution de l'incorporation de la lysine radioactive dans la caséine par les peptides. Il semble donc que les peptides n'ont pas été utilisés tels quels pour la synthèse de la caséine.
