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Colloque
La glutamine synthétase (EC 6.3.1.2) joue un rôle prépondérant dans l'assimilation de l'azote chez les cyanobactéries. La glutamine synthétase de l'algue bleue Anacystis nidulans semble posséder des propriétés particulières. L'enzyme reste, en effet, en bonne partie (>50%) lié aux membranes dans les conditions normales d'extraction. Sa solubilisation nécessite des conditions sévères (détergent ou ODDMA 5%, force ionique 2M, etc.). De plus le détergent ODDMA protège l'activité enzymatique de la GS et peut stimuler cette activité. En tenant compte de ces faits, une procédure de purification a été mise au point. La GS est ainsi purifiée 100 fois et l'électrophorèse sur …
Colloque
Suivant un critère de convergence, les tRNA de la phénylalanine et de la méthionine (initiateurs) constituent chacun une famille de séquences homologues; les tRNA mitochondriaux, cependant, semblent provenir d'une lignée extrêmement ancienne. Les deux arbres phylogénétiques obtenus concordent avec l'historique évolutif des procaryotes et des eucaryotes. La construction de séquences ancestrales et la localisation des points chauds de mutation montrent que le processus évolutif a conservé strictement les bases responsables des interactions en structure tertiaire; les régions du boucle D sont beaucoup plus variables, en tenant que le pairage n'est pas affecté.
Colloque
Pour déterminer l'importance de la glutamine synthétase dans le processus de la fixation de l'azote chez les algues bleues, nous avons étudié le contrôle de l'activité de cet enzyme. Notre étude vise à savoir si deux mécanismes enzymatiques i.e. la répression et le système adénylation-déadénylation de l'enzyme sont présents chez une algue bleue, Anacystis nidulans. Pour vérifier s'il y a répression de l'enzyme, nous avons déterminé, avec des cellules entières, l'activité glutamine synthétase pour des milieux de culture contenant des sources différentes d'azote. L'adénylation de l'enzyme a été déterminé par un test d'activité y-glutamyl transférase en présence ou non de …
Colloque
Des mutants de l'algue bleue, Anacystis nidulans, déficients en polyphosphates ont été isolés. Le méthanesulfonate d'éthyle a été utilisé comme mutagène et la pénicilline employée pour l'enrichissement des cultures en mutants. Les cultures ont été transférées dans un milieu sans sulfate et transférées dans un milieu sans phosphate avant d'être traitées à la pénicilline. Ainsi la souche sauvage qui aurait emmagasiné le phosphate en milieu sulfate est sensible à la pénicilline en milieu sans phosphate. Les mutants ont perdu la capacité d'emmagasiner le phosphate et ne peuvent croître en milieux sans phosphate. Les différentes mesures d'activité de polyphosphate kinase suggèrent …
Colloque
Un extrait cellulaire enrichi en phénylalaninyl-tRNA synthétase a été préparé selon les méthodes déjà publiées à partir de la levure, Saccharomyces cerevisiae. Les protéines de cet extrait précipitant entre 40 et 60 % de saturation en sulfate d'ammonium sont chromatographiées sur une colonne de Séphadex G-100. L'activité de la phénylalaninyl-tRNA synthétase est suivie par la formation de [14C] phénylalaninyl-tRNA en présence de tRNA levure en présence de [C-14]phe. Certains sels, particulièrement le baryum (chlorure ou acétate) et le manganèse à une concentration de 0.1 M dissocient la synthétase en deux sous-unités possédant de l'activité catalytique. Ce phénomène est aussi retrouvé …
Colloque
Un extrait cellulaire enrichi en phénylalaninyl-tRNA synthétase a été préparé selon les méthodes déjà publiées à partir de la levure, Saccharomyces cerevisiae. Les protéines de cet extrait précipitant entre 40 et 60 % de saturation en sulfate d'ammonium sont chromatographiées sur une colonne de Séphadex G-100. L'activité de la phénylalaninyl-tRNA synthétase est suivie par la formation de [14C] phénylalaninyl-tRNA en présence de tRNA levure en présence de [C-14]phe. Certains sels, particulièrement le baryum (chlorure ou acétate) et le manganèse à une concentration de 0.1 M dissocient la synthétase en deux sous-unités possédant de l'activité catalytique. Ce phénomène est aussi retrouvé …
Colloque
En se basant sur une comparaison, deux par deux, des trente-six séquences connues des acides ribonucléiques de transfert (tRNA), Jukes et Holmquist ont proposé qu'au cours de l'évolution des espèces, les tRNA avaient continuellement leur spécificité vis-à-vis des acides aminés. Ceci est indiqué par le fait que deux tRNA du même organisme, mais spécifiques pour les acides aminés différents, ont un niveau de similarité supérieur à celui attendu. En nous basant sur une analyse de congruence des séquences de tRNA par le moyen des distances multidimensionnelles (multidimensional scaling) nous déduisons contrairement à ces auteurs que les tRNA ont vraiment changé …
Colloque
L'inosine est présent à l'extrémité 5' de l'anticodon (position wobble) de plusieurs tRNA provenant d'organismes procaryotes et eucaryotes. Puisque ce nucléoside modifié joue un rôle extrêmement important dans la reconnaissance du RNA messager, nous avons entrepris une étude de sa biosynthèse. Le mutant ade 13 de Saccharomyces cerevisiae a été utilisé. Ce mutant déficient en adénylosuccinate lyase permet d'obtenir des tRNA marqués soit principalement au niveau des adénosines et leurs modifications ou soit au niveau des adénosines et guanosines ainsi que leurs modifications. Nous avons tout d'abord étudié les besoins en adénine du mutant ade 13. Nous avons aussi mis …
