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Lors du choc thermique sur des cellules Kc de Drosophila, on observe la translocation au noyau d'une protéine de 46,000 (Mr) associée au cytosquelette. (Can. J. Biochem. 60, 306, 1982; J. Mol. Biol. 162, 365, 1982). L'immunofluorescence indirecte à l'aide d'un anticorps polyclonal produit contre la 46K, montre que cette protéine migre au noyau à 37°C formant un "cap" périnucléaire. Cet anticorps ne donne de réaction croisée ni contre la vimentine de porc ni contre la même protéine provenant de cellules de 3T3 de souris. Inversement, un anticorps polyclonal contre la vimentine de porc ne réagit pas contre la 46K …
La méthylation post-traductionnelle des histones a été mesurée suite à un choc thermique (C.T.) à des cellules de Drosophila en culture. Dans les conditions normales (23°C), H3 et H4 sont méthylées. Suite à un C.T. à 37°C, on observe une réduction drastique de méthylation de H3 et une augmentation de méthylation de H2B. Ces changements dans les patrons de méthylation des histones sont thermo-dépendants: l'augmentation de la méthylation de H2B est notée à 33°C alors que la chute de méthylation de H3 n'est notable qu'à partir de 35°C. Lorsque les cellules sont soumises à un traitement à l'arsenic qui induit …
La réponse au choc thermique des cellules des glandes salivaires de Chironomus tentans se caractérise, au niveau de la synthèse protéique, par l'apparition d'un nombre limité de polypeptides spécifiques. Par microdissection, nous avons démontré qu'au moins deux de ces protéines sont présentes dans les noyaux isolés de C. tentans et que l'une d'elles (34,000 daltons) s'y concentrait. La présence d'un polypeptide semblable fut vérifiée dans une préparation de noyaux de la lignée cellulaire KClA de Drosophila et dans le cas échéant, cette nouvelle protéine nucléaire s'avérait extrêmement basique. Chez C. tentans, cette protéine se retrouve dans tous les compartiments nucléaires …
L'ADN a été purifié de nucléoles isolés de lymphoblastoïdes humains (Rajii). L'analyse de cet ADN par centrifugation analytique sur CsCl indique la présence d'au moins 5 fractions ayant les densités suivantes: 1.695, 1.697, 1.701, 1.706 et 1.711 g/cm3. Après purification partielle de ces fractions sur gradient préparatif de CsCl, chacune a été soumise à la digestion par l'enzyme de restriction Hae III. L'électrophorèse sur gel d'Agarose 2.5% démontre la présence de profils de restrictions caractéristiques pour les 3 fractions de faible densité tandis que les 2 fractions les plus denses ne sont pas digérées par Hae III. L'hybridation moléculaire avec …
Les glandes salivaires du diptère C. tentans, de par leur caractère polyploïde et leur monocanalicité, constituent un système avantageux pour l'étude du contrôle des mécanismes de transfert de l'information génétique. Exposées par l'intermédiaire des larves de Chironomus à un choc thermique de 39°C, les glandes salivaires sont prélevées et incubées en présence de leucine tritiée. Comme chez la Drosophile, on note une diminution prononcée de la synthèse des protéines nouvelles ainsi que l'apparition de quelques nouvelles protéines cytoplasmiques spécifiques au traitement et dont la plus abondante a un poids moléculaire d'environ 73,000 daltons. La distribution intracellulaire de ces protéines ainsi …
L'ADN humain contient plusieurs fractions d'ADN satellite. Par hybridation "In situ", il a été démontré que ces ADN sont localisés préférentiellement dans les régions de l'hétérochromatine constitutive. Récemment, il a été rapporté que l'une de ces satellites (II) était localisée sur le Y, (9, Al et C) (par ordre décroissant) (Comings et al, 1975). Nous avons isolé une fraction pure d'ADN satellite II (1.696g-cm-3) par centrifugation en gradient de Cs2SO4-Ag. L'hybridation "In situ" d'ARN-H complémentaire à l'ADN II sur des préparations de chromosomes métaphasiques de patients possédant 1,2 ou 3 chromosomes Y indique une absence d'hybridation d'ADN satellite de type …
L'ADN humain contient plusieurs fractions d'ADN satellite. Par hybridation "In situ", il a été démontré que ces ADN sont localisés préférentiellement dans les régions de l'hétérochromatine constitutive. Récemment, il a été rapporté que l'une de ces satellites (II) était localisée sur le Y, (9, Al et C) (par ordre décroissant) (Comings et al, 1975). Nous avons isolé une fraction pure d'ADN satellite II (1.696g-cm-3) par centrifugation en gradient de Cs2SO4-Ag. L'hybridation "In situ" d'ARN-H complémentaire à l'ADN II sur des préparations de chromosomes métaphasiques de patients possédant 1,2 ou 3 chromosomes Y indique une absence d'hybridation d'ADN satellite de type …
Le transport de l'ARN du noyau au cytoplasme a été étudié dans les cellules des glandes salivaires du diptère C. Tentans. L'ARN marqué in vivo par l'injection d'Uridine-3H est extrait de noyaux et de cytoplasmes isolés par microdissection des cellules fixées et analysé par électrophorèse sur gel d'agarose sur l'électrophorimètre de l'ARN messager du filtre Millipore ou sur colonne de Sephadex G-200. En plus des ARN ribosomiaux et 4S, le cytoplasme contient au moins deux populations d'ARN messagers qui diffèrent quant à leur poids moléculaire, leur demi-vie, leur origine mésosomiale et leur temps de résidence intra-nucléaire. Les deux espèces d'ARN …