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Grâce à leurs dimensions exceptionnelles, certains constituants des cellules polyténiques peuvent être isolés mécaniquement, sous un microscope et en milieu aqueux. La fixation dans un mélange d'éthanol et d'acide acétique ne modifie pas le profil électrophorétique des protéines glandulaires salivaires de ces diptères, tel que démontré par électrophorèse en une dimension, sur gel de polyacrylamide. De plus, cette fixation préserve la protéolyse pendant les périodes prolongées nécessaires à la microdissection de constituants cellulaires. Les protéines extraites de noyaux et cytoplasmes révèlent un profil complexe (environ 30 bandes), mais des distributions différentes. Après incubation pendant 18h en milieu de rétention tritiée, …
Le système des glandes salivaires de C. tentans peut être avantageusement utilisé dans l'étude biochimique de protéines spécifiques impliquées dans l'activation génique. Les glandes fixées sont divisées par microdissection en cytoplasme et noyaux. Ces derniers sont à leur tour séparés en leurs constituants: sève nucléaire, nucléoles et chromosomes polyténiques. Nous avons procédé à l'analyse, sur gel de polyacrylamide-SDS, des protéines provenant de ces fractions. Une quarantaine de protéines sont révélées dans le noyau et dans le cytoplasme, certaines semblant uniques au noyau. Au degré de résolution où domine l'électrophorèse en une seule dimension, il semble y avoir peu de différences …
Le système des glandes salivaires de C. tentans peut être avantageusement utilisé dans l'étude biochimique de protéines spécifiques impliquées dans l'activation génique. Les glandes fixées sont divisées par microdissection en cytoplasme et noyaux. Ces derniers sont à leur tour séparés en leurs constituants: sève nucléaire, nucléoles et chromosomes polyténiques. Nous avons procédé à l'analyse, sur gel de polyacrylamide-SDS, des protéines provenant de ces fractions. Une quarantaine de protéines sont révélées dans le noyau et dans le cytoplasme, certaines semblant uniques au noyau. Au degré de résolution où domine l'électrophorèse en une seule dimension, il semble y avoir peu de différences …
La synchrotnie naturelle de P. polycephalum fait de ce matériel un système de choix pour l'étude de nombreux problèmes reliés au cycle cellulaire et à la différenciation. Les auteurs se proposent d'étudier les variations des protéines ribosomiques (stoichiométrie, phosphorylation, acétylation, méthylation) en relation avec le cycle cellulaire et la différenciation. Comme première étape, la caractérisation des protéines du monosome a été entreprise. Les ribosomes ont été préparés par sédimentation différentielle et chromatographie sur hydroxyapatite. Les protéines ont été séparées par électrophorèse en gel à deux dimensions. Approximativement 65 taches peuvent être détectées. Par électrophorèse en SDS on observe 25 bandes …