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Colloque
La partie structurelle du gène de tRNA f-met contient 73 unités nucléotidiques. Cette séquence a été divisée en 6 oligodésoxyribonucléotides synthétisés à l'aide d'un synthétiseur automatique à DNA SAM ONE, de la compagnie Biosearch Inc. Après leur synthèse chimique, les oligonucleotides sont purifiés soit par gel de polyacrylamide dénaturant ou par HPLC. La ligase à DNA est ensuite utilisée pour relier les oligonucleotides et reconstruire le gène de tRNA. Ce gène peut alors être introduit dans un plasmide pouvant transformer E. coli. Une quantité abondante de plasmide est extraite des bactéries, permettant l'étude plus approfondie du gène synthétique. L'étude de …
Colloque
Parallèlement aux études de l'évolution de la structure primaire de la molécule ARN 5S, nous avons entrepris une investigation du développement de la structure secondaire. Ce projet rencontre des difficultés dues à l'insuffisance des résultats expérimentaux sur les paires bases spécifiques qui déterminent cette structure. Notre solution à ce problème est basée sur les valeurs de l'énergie libre connues pour des configurations des oligonucleotides. A partir de l'hypothèse de travail que l'énergie libre d'une structure est approximativement la somme des énergies de toutes les sous-structures qui la constituent, nous nous servons de deux types d'algorithmes, implantés sur ordinateur, pour maximiser …
Colloque
La bactérie photosynthétique, Rhodospirillum rubrum possède deux modes de croissance: photosynthétique (anaérobie) ou oxydatif (aérobie). Nous voulons vérifier si ces deux conditions de croissance engendrent deux compléments de tRNA différents. Après incorporation de 32P0_4, le [32P]tRNAPhe a été isolé de la bactérie, aminoacylé avec [3H]Phe, adsorbé sur colonne de BD-cellulose et élué dans un tampon éthanolique. Le tRNAPhe a ensuite été purifié par chromatographie sur colonne de RPC-5 développée avec un gradient de NaCl. Après purification de chacun des pics obtenus, les différents isoaccepteurs ont été digérés à la RNase T1. Les produits de digestion ont été séparés par électrophorèse …
Colloque
Les RNA 5S et 5.8S ribosomiques se retrouvent dans la grosse sous-unité des ribosomes eucaryotes. La présence du RNA 5.8S est particulière aux eucaryotes et cartographiquement étroitement liée entre un RNA 5S procaryote ou course une position analogue au gène du RNA 5.8S eucaryote sur l'opéron polycistronique du RNA ribosomique dans ces deux types d'organismes. Par comparaison de séquences, nous avons démontré que le RNA 5.8S a une homologie analogue qui traduit par une homologie évolutive des deux espèces. Nous avons démontré que les séquences du RNA 5.8S de levure et les séquences de l'histone d'histone homologuent de l'existence d'une …
Colloque
La modification des 5'-mononucléotides, en milieu aqueux, au moyen de l'anhydride phtalique, des chlorures de phtaloyle et des N-acétyl et N-benzoylimidazoles, résulte exclusivement en une O-acylation. Les purines sont plus susceptibles que les pyrimidines, 8 étant plus réactif que A et pu que G. Les produits de réaction, isolés par chromatographie sur DEAE-cellulose, ont été identifiés comme étant des dérivés mono- et diacylés dans des proportions respectives de 10 à 1. De plus, les chlorures d'iso- et de tétraphétaloyle ont donné, comme produits mineurs de réaction, les diesters des acides phtaliques. Les dérivés imidazoles se sont montrés les moins réactifs …
Colloque
Le travail a porté sur la séparation des oligonucléotides obtenus par hydrolyse du RNA 4S par les RNases A et T1. Sur couche mince de polyéthylèneimine (PEI) cellulose, nous avons pu séparer 100 μg de l'hydrolysat de PHE-t-RNA de levure: la séparation est comparable à ce qu'on obtient sur colonne de DEAE cellulose avec des quantités au moins 10 fois supérieures et aucun matériel n'est laissé à l'origine. L'éluant le plus utile était (NH4)2CO3 0.25M, mais nous avons trouvé que la résolution était augmentée de façon très notable par prétraitement des plaques à l'acide acétique; dans la seconde dimension nous …
