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Colloque
Les estrogènes jouent un rôle essentiel dans le développement et le fonctionnement des tissus responsables de la reproduction, de la fertilité et des fonctions sexuelles chez la femme. De plus, le contrôle de l'activité des estrogènes représente l'approche la plus efficace dans le traitement du cancer du sein et d'autres maladies estrogéno-dépendantes. Ces données nous ont incité à isoler le cDNA encodant l'estradiol déshydrogénase (E2DH), l'enzyme responsable de la transformation de l'estrore précurseur à faible activité estrogénique en estradiol, l'estrogène le plus actif. Le cDNA encodant l'E2DH fut isolé à partir d'une librairie de cDNA de placenta humain construite dans …
Colloque
Il est bien connu que les stéroïdes sexuels peuvent contrôler non seulement la sécrétion des hormones gonadotropes au niveau de l'adénohypophyse mais également la libération de la LHRH (luteinizing hormone-releasing hormone) dans les vaisseaux du système porte hypothalamo-hypophysaire. Cependant, on ne connaît pas encore le rôle de ces stéroïdes sur l'expression génétique de la LHRH par les neurones hypothalamiques. Puisque les neurones à LHRH sont peu nombreux et dispersés dans l'aire préoptique et l'hypothalamus antérieur, nous avons utilisé l'hybridation in situ pour permettre une évaluation du contenu en ARN messager à l'échelle cellulaire pour étudier l'influence des stéroïdes sexuels sur …
Colloque
Nous avons récemment démontré que les récepteurs ß-adrénergiques sont présents dans la prostate ventrale chez le rat (PV). À l'aide d'un puissant marqueur radioactif, le cyanopindolol (CYP-125), nous avons caractérisé le récepteur ß-adrénergique dans une préparation membranaire de PV. Nous avons trouvé que ce ligand se liait à une classe unique de site de haute affinité. De plus, la détermination de l'activité compétitive d'une série de composés antagonistes et agonistes sur la liaison du CYP-125 indique que le ligand se lie à la sous-classe de récepteur ß2-adrénergique. Afin d'identifier le type cellulaire contenant ces récepteurs ß-adrénergiques dans la PV, nous …
Colloque
Afin d'étudier le site de l'action inhibitrice des analogues agonistes de la LHRH, des rats mâles intacts adultes (300-325 g) ont été traités avec D-Ser(TBU)6, des-Gly-NH2(10)LHRH-éthylamide (LHRH-A), 48, 36, 24, 12 et 1 h avant sacrifice. Les cellules interstitielles ont été dissociées et incubées en présence des doses croissantes de hCG pendant 3 h à 34°C. L'administration in vivo de LHRH-A a réduit la sécrétion basale ainsi que la réponse maximale de testostérone (T) in vitro, sans affecter les DE50; Les niveaux de base d'AMP cyclique (AMPc) n'ont pas été affectés, mais LHRH-A a diminué de 25% la réponse d'AMPc …
Colloque
Des études effectuées dans notre laboratoire ont démontré que la sécrétion d'α-MSH dans les cellules du lobe intermédiaire de rat est sous le contrôle stimulateur des récepteurs β-adrénergiques et sous le contrôle inhibiteur des récepteurs dopaminergiques. Récemment, nous avons identifié un troisième récepteur impliqué dans le contrôle de la sécrétion d'α-MSH, le récepteur CRF (corticotropin-releasing factor). Lors d'une incubation de 10 min CRF (100 nM) cause une augmentation de 500% des niveaux d'AMP cyclique (AMPc) avec un EC50 de 6 nM. De plus, l'agoniste dopaminergique, 2-bromocryptine (CB 154), (1 nM) renverse complètement l'augmentation des niveaux d'AMPc induite par isoprotérénol (100 …
Colloque
L'Inhibine est une molécule à caractère hydrophobe et de nature glycoprotéique que l'on retrouve chez de nombreuses espèces animales, au niveau des gonades, autant chez le mâle que chez la femelle. Jusqu'à maintenant les recherches tendent à démontrer que l'inhibine exerce un effet spécifique, diminuant la sécrétion de base de la FSH aussi bien in vivo que in vitro. Utilisant un système de cellules adénohypophysaires en culture primaire comme essai biologique, il est convenu que la baisse de sécrétion de FSH aussi bien sur des niveaux de base que sur des niveaux stimulés par LRH, nous vous présenterons quelques techniques …
Colloque
Le 'growth hormone-releasing factor' pancréatique humain de 44 amino-acides (hp GRF44) est un puissant facteur de libération à la fois de GH et d'AMPc par les cellules adénohypophysaires de rat en culture primaire, avec des Kd voisins d'approximativement 0.1 nM. Dès 5 min après l'addition de 10 nM de GRF44, l'AMPc cellulaire est multiplié par 6, après 30 à 40 min d'incubation, il est augmentée jusqu'à 25 à 30 fois, puis diminue progressivement pour des temps plus longs. La somatostatine (10 nM) provoque une inhibition de 70% de l'accumulation d'AMPc intracellulaire quel que soit le temps d'incubation. Il est difficile …
Colloque
L'EGF inhibe la stéroïdogenèse dans les cellules ovariennes de la granulosa. Afin de mieux caractériser les mécanismes impliqués dans cette action de l'EGF, nous avons étudié la phosphorylation des protéines membranaires ovariennes sous l'influence de l'EGF. Lorsque des membranes plasmiques isolées d'ovaires de rat pur ultracentrifugation sur gradient discontinu de sucrose sont incubées en présence de [γ-32P]ATP (15 µM) à 0° ou 24°C, et sont ensuite soumises à une électrophorèse sur gel de polyacrylamide en présence de SDS, l'EGF stimule rapidement la phosphorylation d'une protéine de 37K. Dans des préparations contrôles utilisant des membranes de foie de rat dans les …
Colloque
Des données récentes indiquent que les agents β-adrénergiques stimulent l'activité de l'adénylate cyclase dans la prostate de rat. Dans le but d'élucider le mécanisme d'action des catécholamines dans la prostate, nous avons caractérisé un récepteur β2-adrénergique à l'aide d'un puissant marqueur, le cyanopindolol-125I (CYP-125I). Le CYP-125I se lie à une classe unique de récepteurs de haute affinité (Kp = 0.3 nM) avec un nombre de sites équivalent à 600 fmol/mg protéine. L'ordre d'activité compétitrice d'une série d'agonistes pour le ligand du ligand est constant avec une interaction à un récepteur β2-adrénergique: (-)isoprotérénol > (-)épinéphrine >> norépinéphrine. La concentration de récepteurs …
Colloque
Suite à un traitement au charbon-dextran activé nous permettant d'éliminer plus de 99% des stéroïdes endogènes contenus dans le liquide folliculaire de porc, nous avons d'abord effectué des précipitations fractionnées au sulfate d'ammonium. La fraction précipitant entre 20 et 40% de saturation a été ultrafiltrée et le liquide retenu par la membrane (YM-10) a été déposé sur une colonne de Concanavaline-A-Sepharose (C16/70). La fraction post-éluée par mannoside absorbé le gel ne contient pas d'activité inhibitrice sur les niveaux de base de sécrétion de FSH contrairement à la fraction glycoprotéique éluée en présence de 50 mm -méthyl-D-glucopyranoside et 0.5M NaCl dans …
