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Colloque
En vue d'évaluer le rôle protecteur des immunoglobulines dans la pneumonie à K. pneumoniae, il a été possible d'adapter la technique des hybridomes pour produire des quantités importantes d'anticorps contre cette bactérie. La fusion implique le myélome SP 2/0 et des cellules de rate de souris BALB/c immunisées avec K. pneumoniae DT-S, biotype 1. Les clones ont été sélectionnés d'après leur aptitude à sécréter des anticorps anti-Klebsiella détectables par une épreuve ELISA. Les clones producteurs sont ensuite amplifiés par passage intrapéritonéal chez la souris. La pneumonie expérimentale est produite chez la souris BALB/c avec la même souche bactérienne DT-S. Une …
Colloque
Plusieurs enquêtes épidémiologiques récentes ont contribué à établir la prévalence de la toxoplasmose au sein de diverses populations humaines et animales disséminées au Canada. Une enquête sur la toxoplasmose a été menée au Québec dans le but de mettre en évidence les corrélations possibles entre cette parasitose et les habitudes de vie des gens atteints. À partir de 3366 personnes distribuées dans les régions de Québec, Chicoutimi et Rimouski, l'échantillon soumis à l'étude fut composé de sujets ayant fourni un sérum. Les résultats obtenus apportent tant des informations sur les paramètres suivants: âge, sexe, profession, résidence rurale ou urbaine, fréquences …
Colloque
Le genre Achromobacter semble être responsable d'infections hospitalières de plus en plus fréquentes et se caractérise par une résistance habituelle aux céphalosporines. Pour chacune des souches étudiées, la présence d'une bêta-lactamase (B.L.) a été démontrée à partir d'extraits purifiés par sonification. L'enzyme a été séparée par chromatographie d'affinité en utilisant une Céphalosporine-C couplée à la Sépharose 4B. La caractérisation de la B.L. a inclus : le profil d'activité, le point isoélectrique, le poids moléculaire, l'inhibition par la cloxacilline (Ki) et les valeurs cinétiques (Km et Vmax) par une méthode microadiabatique automatique et couplée à l'ordinateur. Ces déterminants ont été faits …
Colloque
La résistance bactérienne aux bêtalactamines est connue chez les Neisseriaceae soit due à un processus enzymatique soit à la production d'une bêtalactamase. Ainsi, on a retrouvé l'une d'entre elles, TEM, chez N. gonorrhoeae. Le cas des Acinetobacter est étudié ici à partir de 10 souches résistantes à la pénicilline. Une activité de type bêta-lactamase a été observée chez toutes ces souches. Cinq de ces souches ont été purifiées et cinq de ces souches par chromatographie d'affinité. Les mesures constantes de Michaelis, les poids moléculaires et du poids moléculaire ont été réalisées. L'identification a été effectuée aussi et faite à l'aide …
Colloque
La production simultanée de deux β-lactamases par une bactérie résistante est un phénomène apparemment rare et difficilement mis en évidence par les méthodes enzymologiques usuelles. L'utilisation de méthodes biologiques (antisérums, diffusion en gélose) en combinaison avec des méthodes biochimiques (microacidimétrie, purification par chromatographie d'affinité) permet de révéler aisément la présence de deux enzymes, chez les souches qui montrent un profil de résistance élevé, à la fois vis-à-vis des pénicillines et des céphalosporines.
Colloque
Des transferts in vivo de la résistance bactérienne ont été tentés chez la souris dans le système suivant : une souche de Salmonella St-Paul, porteuse du plasmide TEM qui lui confère une résistance enzymatique vis-à-vis des Bêta-lactamines, est utilisée comme donatrice. Les bactéries de la flore normale du tube digestif agissent alors comme réceptrices. Les transferts sont repérés par une technique d'immuno-acidimétrie, chez les souches susceptibles d'avoir reçu le plasmide.
Colloque
Dans la plupart des cas, la résistance bactérienne vis-à-vis des pénicillines et des céphalosporines est due à la production d'une ßeta-lactamase. Cette enzyme inactive l'antibiotique par hydrolyse et la transformation de l'acide correspondant. Cette propriété permet de suivre une réaction enzymatique par acidimétrie et de mesurer les constantes Km et Vmax rapidement et avec une précision acceptable. Par cette méthode, nous avons étudié et caractérisé les ßeta-lactamases chez une douzaine de souches d'entérobactéries présentant des profils de résistance comparables à celui conféré par le gène TEM ainsi que deux autres souches présentant un profil de résistance différent. Les avantages de …
Colloque
On a mis au point une méthode de chromatographie d'affinité destinée à purifier des ßeta-lactamases de bactéries résistantes aux antibiotiques du groupe des pénicillines ou céphalosporines. La purification d'une céphalosporinase d'une souche de Klebsiella pneumoniae est présentée ici. Les colonnes d'affinité sont obtenues en fixant sur un support, la Sépharose 4B activée au CNBr, un inhibiteur réversible de l'enzyme, la céphalosporine C, qui permet de piéger l'enzyme. La chromatographie est faite à partir d'un extrait bactérien brut et se déroule dans un gradient de NaCl. La purification de l'enzyme est excellente. L'application de cette méthode de chromatographie aux différentes classes …
